Peprotech細胞因子其他常見問題

2021-06-22

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其他常見問題

● Peprotech細胞因子的穩(wěn)定性如何？?

除特殊說明之外，Peprotech的細胞因子或重組蛋白均以凍干粉形式提供，這使得細胞因子或重組蛋白在室溫條件下便非常穩(wěn)定。盡管如此，還是建議將細胞因子或重組蛋白置于-20℃或-80℃儲存，可穩(wěn)定數(shù)年。

重懸后的細胞因子或重組蛋白，在4℃條件下可短期儲存1-2周左右的時間，具體請參考具體產(chǎn)品的COA。若要長期儲存，需使用含載體蛋白的溶液稀釋已重懸的細胞因子或蛋白，分裝后請置于-20℃或-80℃儲存。為避免蛋白部分變性，在凍存期間請避免重復凍融循環(huán)。

●?PeproTech細胞因子的內(nèi)毒素水平如何？?

PeproTech大部分無動物成分級別細胞因子的內(nèi)毒素水平均保證低于0.01 ng/μg蛋白，即0.1 EU/μg蛋白。對于大多數(shù)非無動物成分級別的細胞因子，內(nèi)毒素水平保證低于0.1 ng/μg蛋白，即1 EU/μg。事實上許多細胞因子的實際內(nèi)毒素含量均低于說明書上標注的內(nèi)毒素水平。

●?ED50和units/mg均用來表示比活性(specific activity)，兩者之間有什么關聯(lián)？?

ED50的定義是可誘導50%最大反應的細胞因子濃度，而比活性(specific activity)是單位重量蛋白樣品中所含的活性單位。比活性單位(Specific Activity Units)只能用于表示蛋白的效能，且僅適用于劑量反應曲線為S形的蛋白。以ng/ml為單位的ED50和以units/mg為單位的比活性之間的換算公式為：
Peprotech細胞因子其他常見問題

●?比活性單位(specific activity units)和活性的國際單位(International Units)之間有什么關聯(lián)？

比活性單位和國際單位(IU)之間沒有直接的關聯(lián)，不能相互換算。

國際單位(IU)是與國際標準品的活性單位(即IU/ng)比對后得出的活性數(shù)值，后者是在世界衛(wèi)生組織(WHO)領導的國際合作研究中確定的。WHO國際標準品由英國國家生物制品檢定所(NIBSC)制備和提供。

簡單地與國際標準品比對而得出的蛋白活性國際單位(IU)常會出現(xiàn)偏差，原因是每個蛋白廠家所用的活性檢測方法很難一致，從而導致與國際標準品比對后得到的國際單位(IU)值相互間不具可比性。想要實現(xiàn)真正的可比性，必須建立標準的活性檢測方法，以保證所得出的蛋白活性國際單位(IU)值僅與蛋白的質量有關，而與蛋白的來源無關。

●?PeproTech是怎樣得到蛋白活性的國際單位(IU)值的？?

在可能的情況下，PeproTech通過將自己的產(chǎn)品與對應的WHO標準品在自已的生物活性測試中進行多次平行比對來得出國際單位(IU)值。多次對比可保證我們能夠排除因測試本身的不穩(wěn)定性(如產(chǎn)品批次，使用方法和測試方案等的變異性)而導致的異常值的出現(xiàn)。經(jīng)多次比對得出的結果可對我們產(chǎn)品的國際單位(IU)值進行可靠的定量。

●?為什么收到Peprotech的細胞因子之后，在產(chǎn)品管中看不到任何蛋白團塊或粉末狀產(chǎn)品？?

與市場上的許多蛋白產(chǎn)品不同，PeproTech的產(chǎn)品中不含任何載體蛋白和其它添加物（如BSA, HSA和蔗糖等），并且常在最低含鹽量的溶液中凍干，結果是微量的蛋白在凍干過程中會沉積在管壁上，形成蛋白薄膜，有時肉眼觀察不到。建議在打開管蓋前用小離心機快速離心20-30秒，使附著在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底。盡管可能看不到蛋白團塊，但Peprotech的質控程序保證每管中的蛋白含量準確無誤。

●?無動物組分（Animal Free, AF）重組蛋白和普通科研級別（RUO）重組蛋白的區(qū)別

無動物組分（AF）的細胞因子或重組蛋白與普通科研級別（RUO）的細胞因子或重組蛋白相比在蛋白生物活性及氨基酸序列上是完全一致的，最主要的區(qū)別是在蛋白的表達細胞及表達體系上。無動物組分的細胞因子或蛋白均為原核表達，在傳統(tǒng)表達法的基礎上對培養(yǎng)體系進行了改進，在培養(yǎng)過程中不加入蛋白胨或牛血清等動物成分，因此最后所得到的細胞因子或蛋白是不含有任何動物成分的。這使得其在使用過程中不會給培養(yǎng)體系引入動物源的病毒，更適用于體內(nèi)實驗，可保證實驗結果的穩(wěn)定性。具體信息請見下表：

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●?在查找Peprotech細胞因子的過程中，經(jīng)常有客戶會遇到這樣的問題，想查找Mouse的某指標產(chǎn)品，但發(fā)現(xiàn)官網(wǎng)沒有，只能找到人的，例如客戶要找Mouse CNTF，卻只找到了Human CNTF，此時是否可以使用呢？?

對于這種情況，建議查看官網(wǎng)產(chǎn)品頁面所列出的crossreactivity，如下圖所示。在Peprotech官網(wǎng)列出的交叉種屬中，如果點擊交叉種屬可以轉入?yún)⒖嘉墨I的界面，是已經(jīng)有客戶將該產(chǎn)品應用于該種屬發(fā)表了文章的種屬，可以將其推薦給客戶，并且可以售后，例如點擊Mouse，會自動轉入?yún)⒖嘉墨I界面（如下圖）。但是，如果在交叉種屬下面沒有文獻鏈接的種屬，是指蛋白同源性高才會被列舉到交叉反應中，要推薦給客戶的話，需要提前咨詢一下Peprotech的技術，如果廠家經(jīng)過比對或者經(jīng)過核實，確定是可以推薦給客戶的，那么這個蛋白是有售后的，否則只能建議客戶嘗試，但不保售后。

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