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InvivoGen解碼STING

2021-05-08
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STING(干擾素基因刺激物)是天然免疫學(xué)研究和免疫治療領(lǐng)域的新貴,它可被小核酸,包括cyclic?dinucleotideCDNs)所激活,從而誘導(dǎo)I型干擾素和其它炎癥因子的產(chǎn)生。STING的配體包括微生物在感染過程中釋放的CDNs,和cGAS應(yīng)答胞漿DNA過程中產(chǎn)生的內(nèi)源性CDN?23-cGAMP。關(guān)于STING的功能、STING與其它核酸感知物及配體間的相互作用、STING在感染性疾病,癌癥,自身免疫病及疫苗佐劑中的作用等,雖然文獻報道與日俱增,卻仍有很多研究需要深入探討。InvivoGen公司提供全世界最全的STING產(chǎn)品,協(xié)助您研究STING應(yīng)答機制以及STING相關(guān)疾病的治療。

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STING??STINGStimulator?of?interferon?genes,干擾素基因刺激物,又名TMEM173、ERISMITA、MPYS、NET23),是一個內(nèi)質(zhì)網(wǎng)接頭和感知蛋白,它在天然免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用,特別是在維持機體動態(tài)平衡、抵御外來感染以及預(yù)防腫瘤和自身免疫病方面。STING活化之后,通過TBK1TANK結(jié)合激酶1/?IRF3(干擾素調(diào)節(jié)因子31信號通路來誘導(dǎo)I型干擾素(如IFN-β)的表達,還可通過NF-kB信號通路來調(diào)控炎癥因子(如TNF-αIL-6)的表達1,2。這些細胞因子可高效調(diào)控一系列下游分子事件,包括多種免疫細胞、其它細胞因子和趨化因子。

STINGCyclic?dinucleotide??STING可被小核酸,即cyclic?dinucleotideCDNs)活化,這些CDNs包括c-di-GMP3、c-di-AMP4cGAMP5,6。值得一提的是,在STING被發(fā)現(xiàn)之前,其中一些CDNs已被證明是微生物中的重要第二信使分子。十年前,c-di-GMP已被發(fā)現(xiàn)可在哺乳動物細胞(真核細胞)中引起強烈的免疫反應(yīng);直到最近,它和其它CDNs才被發(fā)現(xiàn)是STING激動劑。外來微生物感染過程中,宿主細胞表達的STING可被侵襲微生物釋放的CDNs激活。

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產(chǎn)品名稱貨號介紹
c-di-AMPtlrl-nacda來源于細菌的細胞壁代謝過程中的第二信使,被DDX41識別,也可以激活STING/TBK1/IRF3通路,最近的研究表明,通過黏膜途徑免疫,c-di-AMP具有較好的佐劑效果。
2'3'-c-di-AMPtlrl-nacda232'3'-c-di-AMP是c-di-AMP的同源物質(zhì),通過直接結(jié)合STING,誘導(dǎo)產(chǎn)生I型干擾素。?與c-di-AMP相比,2'3'-c-di-AMP具有較好的誘導(dǎo)I型干擾素效果。
c-di-AMP?Controltlrl-napapa陰性對照。
c-di-AMP?VacciGrade?vac-nacdac-di-AMP?VacciGrade??是c-di-AMP的臨床前級別刺激物。
c-di-GMP?tlrl-nacdgc-di-GMP來源于細菌第二信使,并不存在與哺乳動物中。c-di-GMP可以激活STING/TBK1/IRF3通路,?也可以被DDX41識別。最近的研究表明,c-di-AMP具有較好的佐劑效果。
c-di-GMP?Fluorinatedtlrl-nacdgfc-di-GMP?Fluorinated是c-di-GMP的同源物,加入氟原子可以增強c-di-GMP的藥代穩(wěn)定性。在低濃度情況下,c-di-GMP?Fluorinated相比c-di-GMP具有較強I型干擾素誘導(dǎo)效果。
c-di-GMP?VacciGrade?vac-nacdgc-di-GMP?VacciGrade??是c-di-GMP的臨床前級別刺激物。
c-di-GMP?Controltlrl-napgpg陰性對照。
c-di-IMP?tlrl-nacdic-di-IMP是c-di-GMP和c-di-AMP的同源物,更傾向于與STING結(jié)合并誘導(dǎo)I型干擾素。疫苗佐劑研究也有相關(guān)引用。
c-di-UMPtlrl-nacdu陰性對照。


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Cytosolic?DNA,cGASSTING??最近天然免疫學(xué)研究領(lǐng)域的一個重大突破是多細胞生物體cGAMP和胞漿DNA感受因子,以及cGAS(環(huán)-GMP-AMP合成酶)被幾個實驗室同時發(fā)現(xiàn)5,7。監(jiān)測到病毒、細菌或細胞漿中的內(nèi)源DNA后,cGAS誘導(dǎo)產(chǎn)生cGAMP,cGAMP與STING結(jié)合后誘導(dǎo)I型干擾素產(chǎn)生。

Microbial?vs.?metazoan?CDNs??(微生物和多細胞生物的CDNs)?非常有趣的是,后來人們才發(fā)現(xiàn)多細胞生物體也可以合成內(nèi)源的CDNs來激活STING。對于微生物的CDNs,兩個核苷酸之間是通過經(jīng)典的磷酸二酯鍵[G(3,5)pA(3,5)p]相連接的;與此不同的是,多細胞生物體的CDNs,兩個核苷酸之間通過非經(jīng)典的磷酸二酯鍵a[G(2,5)pA(3,5)]相連接6,8。因而產(chǎn)生了細菌CDN的3,3-cGAMP和哺乳動物cGAS-cGAMP的2,3-cGAMP兩種不同命名方式。有意思的是,細菌3,3-cGAMP和多細胞生物2,3-cGAMP結(jié)合在STING的同一活性部位上9。

CDNs的體內(nèi)穩(wěn)定性??CDNs在體內(nèi)可被多種核酸酶和磷酸二酯酶降解,其中一些具有高度特異性。特別是,ENPPI酶可降解2,3-cGAMP卻不能降解它的合成類似物二聚寡核苷酸類似物或經(jīng)典的3,3-cGAMP25。其中一些酶對于微生物感染過程至關(guān)重要,例如,結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium?tuberculosis)能夠成功感染宿主的重要原因之一就是致病菌能夠利用它的磷酸二酯酶降解自己的c-di-AMP,從而阻止其對宿主STING通路的激活26。因此,利用STING作為藥物靶點的策略之一就是設(shè)計人工合成不能被酶解的CDNs。

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產(chǎn)品名稱貨號介紹
3'3'-cGAMPtlrl-nacga來源于細菌,屬于第二信使。直接與STING結(jié)合,激活STING/TBK1/IRF3通路,誘導(dǎo)產(chǎn)生I型干擾素。與?c-di-IMP,?c-di-AMP?和?c-diGMP相比,3‘3’-cGAMP具有較強的IRF3激活性能。
3'3'-cGAMP?Controltlrl-napgpa陰性對照。
3’3’-cGAMP?VacciGrade??vac-nacga3’3’-cGAMP?VacciGrade??是3’3’-cGAMP的臨床前級別刺激物。
2’3’-cGAMP?tlrl-nacga232’3’-cGAMP來源于哺乳動物,由cGAS代謝產(chǎn)生,與STING親和力很強,激活STING/TBK1/IRF3通路,誘導(dǎo)產(chǎn)生I型干擾素。2‘3’-cGAMP具有較強的I型干擾素誘導(dǎo)效果。
2'3'-cGAMP?Controltlrl-nagpap陰性對照。
2’3’-cGAMP?VacciGrade?vac-nacga232’3’-cGAMP?VacciGrade??是2’3’-cGAMP的臨床前級別刺激物。
2’3’-cGAM(PS)2?(Rp/Sp)tlrl-cga2srs2’3’-cGAM(PS)2?(Rp/Sp)是2’3’-cGAMP的異構(gòu)體,不易被ENPP1等酶解,可用于治療,佐劑等研究。
2’2’-cGAMPtlrl-nacga222’2’-cGAMP是cGAMP的異構(gòu)體,在功能上,與2’3’-cGAMP較為相近。
DMXAAtlrl-dmx鼠源STING刺激物,具有很好的抗腫瘤療效。



STING和其它核酸感受器??越來越多的證據(jù)表明cGAS是最為關(guān)鍵的細胞漿DNA感受器,可以引起STING的活化。STING上游的一些其它感受分子可能與其有相互作用,包括IF11610、DDX4111、MRE1112IFIX13(如圖所示)。除了可對胞內(nèi)DNA產(chǎn)生反應(yīng)外,STING還可參與RIG-1識別病毒RNA后激活的信號通路,這些病毒包括日本腦炎病毒、新城疫病毒和水皰性口炎病毒14STING、cGAS和其它DNA感受分子間的相互作用需要進一步闡明。


產(chǎn)品名

貨號

介紹

HSV-60

tlrl-hsv60n

DAI?IFI16

HSV-60c?Naked?(control)

tlrl-hsv60cn

陰性對照。

HSV-60c/LyoVec??(control)

tlrl-hsv60cc

陰性對照。

ISD?Naked

tlrl-isdn

可被多種包內(nèi)受體識別。

ISD/LyoVec?

tlrl-isdc

脂質(zhì)體包被,可被多種包內(nèi)受體識別。

ISD?Control?Naked

tlrl-isdcn

陰性對照。

ISD?Control/LyoVec?

tlrl-isdcc

陰性對照。

Poly(dA:dT)

tlrl-patn

DAI,?LRRFIP1AIM2。Poly(dA:dT)也可間接被?RIG-I識別。

Poly(dA:dT)?Rhodamine

tlrl-patrh

rhodamine熒光標記。

Poly(dA)

?tlrl-pan

Poly(dA)Poly(dA:dT)的陰性對照。

Poly(dG:dC)

tlrl-pgcn

RIG-I,LRRFIP1

Poly(dG:dC)?/?LyoVec?

tlrl-pgcc

脂質(zhì)體包被。RIG-I,LRRFIP1

VACV-70?Naked

tlrl-vav70n

?IFI16

VACV-70/LyoVec?

tlrl-vav70c

脂質(zhì)體包被。?IFI16

VACV-70c?Naked?(control)

tlrl-vav70cn

陰性對照。

VACV-70c/LyoVec??(control)

tlrl-vav70cc

陰性對照。

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STING和人類健康??作為細胞因子信號通路的調(diào)節(jié)者,STING與多種疾病的病理及臨床表癥密切相關(guān),包括前面提及的感染性疾病、癌癥和自身免疫病。?一般情況下,STING的正常活性維持免疫系統(tǒng)的正常功能,STING活性缺失導(dǎo)致免疫缺陷,STING過度活化導(dǎo)致免疫過激。值得一提的是,cGAS/STING信號通路的正常活化可引發(fā)機體對腫瘤細胞的免疫應(yīng)答15,16,進而增強腫瘤放射療法的療效:cGAS可感知被殺死的腫瘤細胞釋放的DNA,來活化STING來誘導(dǎo)樹突狀細胞產(chǎn)生I型干擾素,進而激活潛在的抗腫瘤免疫反應(yīng)17。STING活性的缺失可引發(fā)腫瘤或一些特定的病毒感染18,19。例如,登革病毒的蛋白酶NS2B3可通過降解STING來阻礙IFN-α/β的產(chǎn)生20。因此,可激活STINGCDNs被廣泛用作疫苗佐劑或免疫激活劑2122。反之,過度的STING活性被認為與多種自身免疫病有關(guān),包括狼瘡23?和SAVISTING-Associated?Vasculopathy?with?Onset?in?Infancy24。綜上,STING激動劑可通過激活STING從而達到疾病治療的效果,而STING抑制劑亦可以調(diào)節(jié)STING而控制持續(xù)活化的細胞因子來降低危害。

STING的基因多樣性??人源STINGTmem173基因所編碼,在人群中具有多個剪接體,最為常見的是R232剪接體,被作為野生型。最新研究表明,STING剪接體間的微小區(qū)別可導(dǎo)致重大的功能差異。例如,R232Q突變體感知微生物CDNs的能力相對于野生型顯著降低;另一個突變體,V155M,是一個功能增強型突變,能夠組成性激活STING,上調(diào)I型干擾素的表達,從而導(dǎo)致自身炎癥性疾病23,24。深入了解STING剪接體的臨床意義將有助于以STING為基礎(chǔ)的診斷治療手段的開發(fā)。

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STING變異

產(chǎn)品名稱

貨號

介紹

STING-WT

pUNO1-hSTING

puno1-hstingwt

野生型STING


pUNO1-mSTING

puno1-mstingwt

野生型STING


pUNO1-hSTING-HA3x

puno1ha-hsting

野生型STINGHA-tag


pUNO1-mSTINGwt-HA3x

puno1ha-mstingwt

野生型STINGHA-tag

STING-變異株

pUNO1-hSTING-A162

puno1-hsting-a162

DMXAA有應(yīng)答。


pUNO1-hSTING-A230

puno1-hsting-a230

對低濃度CDNs應(yīng)答效果增加。


pUNO1-hSTING-H232

puno1-hsting-h232

在人群中,此變異株占14%,對CDNs無應(yīng)答。


pUNO1-hSTING-HAQ

puno1-hsting-haq

I型干擾素有較低誘導(dǎo)性。


pUNO1-hSTING-M155

puno1-hsting-m155

持續(xù)激活STING通路。


pUNO1-hSTING-MRP

puno1-hsting-mrp

STING的顯性負突變株。


pUNO1-hSTING-N200

puno1-hsting-n200

STING活性喪失。


pUNO1-mSTING-Gt

puno1-msting-gt

STING活性喪失。


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InvivoGenSTING??InvivoGen公司提供最全面的STING相關(guān)產(chǎn)品,并不斷更新產(chǎn)品目錄,幫助您進行STING領(lǐng)域的體內(nèi)和體外研究,其中包括STING激動劑、各種STING剪接體質(zhì)粒、STING報告細胞系(包括STING敲除細胞系)、型干擾素的ELISA試劑盒和CDN磷酸二酯酶ENPPI)質(zhì)粒。我們緊隨科研新發(fā)現(xiàn)的腳步,不斷更新STING配體,包括天然CDNs和類似合成物等。我們還提供癌癥治療劑DMXAA,STING的鼠源特異性激動劑。另外,我們研發(fā)了一系列STING-IFN信號通路中多種重要分子的基因敲除THP-1RAW細胞系、及以這些基因為靶點的siRNA。這些基因包括TBK1IRF3,以及最近被證明與cGAS/STING有相互作用的蛋白,例如AIM2,IFI16,cGASDDX41,TREX1RIG-I

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STING報告細胞系

STING激活后通過IRFs(干擾素調(diào)節(jié)因子)來誘導(dǎo)ISG(干擾素激活基因)的表達。為了方便您分析研究STING的配體,InvivoGen開發(fā)了STING被敲除(knockout)的穩(wěn)定的報告細胞系。這些細胞系采用IRF誘導(dǎo)的分泌型的報告蛋白,SEAP(分泌型堿性磷酸酶)或Lucia熒光素酶作為監(jiān)測指標。

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種屬

產(chǎn)品名

貨號

人源

THP1-Dual??cells

thpd-nfis

THP1-Dual??KO-STING?cells

thpd-kostg

THP1-Dual??KO-TREX1?cells

thpd-kotrex

THP1-Dual??KO-IFI16?cells

thpd-koifi16

THP1-Dual?KO-MyD?Cells

thpd-komyd

THP1-Blue??ISG?Cells

thp-isg

?InvivoGen解碼STING


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種屬

產(chǎn)品名

貨號

鼠源

RAW-Lucia??ISG?cells

rawl-isg

RAW-Lucia??ISG-KO-STING?Cells

rawl-kostg

RAW-Lucia??ISG-KO-cGAS?Cells

rawl-kocgas

RAW-Lucia??ISG-KO-IFI16?Cells

rawl-koif16

RAW-Lucia??ISG-KO-TBK1?Cells

rawl-kotbk

RAW-Lucia??ISG-KO-IRF7?Cells

rawl-koirf7

RAW-Lucia??ISG-KO-IRF3?Cells

rawl-koirf3

RAW-Lucia??ISG-KO-TREX1?Cells

rawl-kotrex

B16-Blue??ISG?Cells

bb-ifnabg

B16-Blue??ISG-KO-STING?Cells

bb-kostg

?InvivoGen解碼STING



型干擾素ELISA檢測試劑盒??LumiKine?

LumiKine?是InvivoGen公司提供的新一代免疫試劑盒,可快速、靈敏、特異性檢測細胞因子,特別是型干擾素的水平。通過采用光敏快速的Lucia熒光素酶(QUANTI-Luc?)生物發(fā)光監(jiān)測系統(tǒng)替代了傳統(tǒng)ELISA的以吸光度為基礎(chǔ)的酶聯(lián)免疫法,亦可通過streptavidin結(jié)合劑,用普通的酶標儀進行檢測。



LumiKine??Xpress?kits

Cat.?Code

Target

Standard

Sensitivity

LumiKine??Xpress?hIFN-α

luex-hifna

a1, a2,?a4, a5,?a6,?a7,?a8, a13,?a16

HEK293-expressed?human?IFN-α2

10?pg/ml

LumiKine??Xpress?mIFN-α

luex-mifna

a1,a2,?a4,?a5,?a6

HEK293-expressed?murine?IFN-α2

8?pg/ml

LumiKine??Xpress?hIFN-β

luex-hifnb

Natural?and?recombinant?human?IFN-β

CHO-expressed?human?IFN-β

32?pg/ml

LumiKine??Xpress?mIFN-β

luex-mifnb

Natural?and?recombinant?murine?IFN-β

HEK293-expressed?murine?IFN-β

10?pg/ml




LumiKine??kits

Cat.?Code

Target

Standard

Sensitivity

LumiKine??hIFN-α

lumi-hifna

a1, a2,?a4, a5,?a6,?a7,?a8, a13,?a16

CHO-expressed?human?IFN-α2

16?pg/ml

LumiKine??mIFN-α

lumi-mifna

a1,a2, a4, a5, a6

HEK293-expressed?mouse?IFN-α2

20?pg/ml

LumiKine??hIFN-β

?lumi-hifnb

Natural?and?recombinant?human?IFN-β

CHO-expressed?human?IFN-β

60?pg/ml

LumiKine??mIFN-β

lumi-mifnb

Natural?and?recombinant?murine?IFN-β

HEK293-expressed?murine?IFN-β

16?pg/ml




參考文獻:?

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