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“什么限制了您的文章發(fā)表?”“組織圖片自發(fā)熒光太亮”

2021-04-28
瀏覽次數(shù): 192

在免疫組化檢測過程中,許多樣本組織會(huì)產(chǎn)生可通過各種波長濾光片的組織內(nèi)源性自發(fā)熒光,干擾抗體標(biāo)記的目的蛋白熒光的觀察,甚至導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。為了解決免疫組化實(shí)驗(yàn)中的自發(fā)熒光,VectorLabs公司專門開發(fā)了一款Vector??True VIEW? Autofluorescence Quenching Kit試劑盒,該產(chǎn)品旨在去除組織切片中由于醛固定、紅細(xì)胞以及膠原蛋白/彈性蛋白結(jié)構(gòu)造成的自發(fā)熒光。該試劑使用方便,無需稀釋操作,為即用型試劑。?該試劑盒中含有防自發(fā)熒光效果excellent的VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 封片劑(含或不含DAPI兩種)??蛻魺o需單獨(dú)購買封片劑,經(jīng)濟(jì)、實(shí)用。

注意:該試劑盒對(duì)脂褐素造成的組織自發(fā)熒光無效。


● 試劑盒組成:?

a. Vector?TrueVIEW? Reagent A 5ml?b. Vector?TrueVIEW? Reagent B 5ml?c. Vector?TrueVIEW? Reagent C 5ml?d. VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 2ml?e. VECTASHIELD Vibrance Antifade? Mounting Media with DAPI 2ml

其中,貨號(hào)SP-8400包含a,b,c,d四個(gè)組分;貨號(hào)SP-8500包含a,b,c,e四個(gè)組分


●?產(chǎn)品使用方法:

揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵”——Vector True VIEW? Kit快速獲得高質(zhì)量圖片?將ReagentA、B、C以1:1:1的比例混合。(注意混合順序,先將A和B以1:1比例混合10s,再加入C,混勻10s)揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵”——Vector True VIEW? Kit快速獲得高質(zhì)量圖片?
揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵”——Vector True VIEW? Kit快速獲得高質(zhì)量圖片?將混好后的TrueView試劑滴加到組織樣本切片上,將樣本完全覆蓋,孵育2-5min揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵”——Vector True VIEW? Kit快速獲得高質(zhì)量圖片?
揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵”——Vector True VIEW? Kit快速獲得高質(zhì)量圖片?使用PBS緩沖液洗片5次,除去多余緩沖液,VECTASHIELD?Vibrance Media封片后觀察揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵”——Vector True VIEW? Kit快速獲得高質(zhì)量圖片?

●?產(chǎn)品特征?

A 顯著降低背景染色并保留特異性抗原染色;?B 提高信噪比;?C 產(chǎn)品穩(wěn)定,儲(chǔ)存在滴瓶中,使用方便;?D 操作簡單,快速;整個(gè)染色過程僅需2-5min;?E 為使用者提供清晰、明確、真實(shí)的染色結(jié)果;?F 適用于多種熒光染料的自發(fā)熒光去除,包括Alexa488,Alexa 594,DyLight 488,DyLight 594,F(xiàn)ITC,Cyanine 5和GFP;

G SP-8500試劑盒中的封片劑中DAPI濃度較高,可對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行清晰的染色。


●?產(chǎn)品對(duì)自發(fā)熒光淬滅效果:

◆?右圖為經(jīng)Vector?TrueVIEW?kit處理后,人腎臟組織切片中自發(fā)熒光淬滅的百分比與處理時(shí)間之間的關(guān)系。?◆?Note:2分鐘內(nèi)即可達(dá)到最大淬滅效果。揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵”——Vector True VIEW? Kit快速獲得高質(zhì)量圖片?


●?產(chǎn)品應(yīng)用舉例:??

> 案例一

未經(jīng)任何處理使用Vector?TrueVIEW?處理
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◆ 上圖為人脾臟組織染色結(jié)果:使用VectaFluor TM Duet試劑盒(DK-8818)檢測的mouse anti-CD20(red)和rabbit anti-Ki67(green)對(duì)人脾組織切片的染色。?◆?左圖為未經(jīng)任何處理的染色結(jié)果,?◆?右圖為使用TrueVIEW?Autofluorescence Quenching試劑盒染色結(jié)果。于未經(jīng)處理的染色結(jié)果相比,經(jīng)TrueVIEW?Autofluorescence Quenching試劑盒處理后,自發(fā)熒光顯著減少。


>?案例二

揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵”——Vector True VIEW? Kit快速獲得高質(zhì)量圖片?◆?A-D圖為人腎臟切片(石蠟切片)染色結(jié)果,實(shí)驗(yàn)中使用anti-AE1 /AE3抗體對(duì)角蛋白進(jìn)行染色(綠色)?!?A圖未經(jīng)處理,?◆?B-D圖經(jīng)TrueVIEW?Quencher Kit處理。自發(fā)熒光明顯減弱。延長曝光時(shí)間,陽性信號(hào)強(qiáng)度也隨之增強(qiáng)。
揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵”——Vector True VIEW? Kit快速獲得高質(zhì)量圖片?揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵”——Vector True VIEW? Kit快速獲得高質(zhì)量圖片揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵”——Vector True VIEW? Kit快速獲得高質(zhì)量圖片


>?案例三

未經(jīng)任何處理使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI處理

揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵”——Vector True VIEW? Kit快速獲得高質(zhì)量圖片

揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵”——Vector True VIEW? Kit快速獲得高質(zhì)量圖片
◆?上圖為人胰腺組織染色結(jié)果:綠色為insulin的染色。
◆?左圖為未經(jīng)任何處理的染色結(jié)果,
◆?右圖為使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI(SP-8500)試劑盒染色結(jié)果。與未經(jīng)處理的染色結(jié)果相比,經(jīng)該試劑盒處理后,自發(fā)熒光顯著減少,核染色顯著增強(qiáng)。


>?案例四

未經(jīng)處理(內(nèi)源性自發(fā)熒光)??經(jīng)TrueVIEW?Quencher Kit處理
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Company ACompany BCompany C
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Copper Sulfate SolutionSodium BorohydrideSudan Black B
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●?產(chǎn)品訂購信息?Vector??True VIEW? Autofluorescence Quenching Kit

產(chǎn)品貨號(hào)規(guī)格染色切片數(shù)
Vector??True VIEW?
Autofluorescence Quenching Kit
SP-840015ml100-150
Vector??True VIEW?
Autofluorescence Quenching Kit
SP-850015ml100-150
VECTOR TrueVIEW??
Autofluorescence Quenching Kit (3ml)
SP-84033ml~30
VECTASHIELD??HardSet?
Antifade Mounting Medium
H-140010ml100-150
VECTASHIELD??HardSet?
with DPI Antifade Mounting Medium
H-150010ml100-150




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