在免疫組化檢測過程中,許多樣本組織會產(chǎn)生可通過各種波長濾光片的組織內(nèi)源性自發(fā)熒光,干擾抗體標(biāo)記的目的蛋白熒光的觀察,甚至導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。為了解決免疫組化實(shí)驗(yàn)中的自發(fā)熒光,VectorLabs公司專門開發(fā)了一款Vector??True VIEW? Autofluorescence Quenching Kit試劑盒,該產(chǎn)品旨在去除組織切片中由于醛固定、紅細(xì)胞以及膠原蛋白/彈性蛋白結(jié)構(gòu)造成的自發(fā)熒光。該試劑使用方便,無需稀釋操作,為即用型試劑。?該試劑盒中含有防自發(fā)熒光效果excellent的VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 封片劑(含或不含DAPI兩種)。客戶無需單獨(dú)購買封片劑,經(jīng)濟(jì)、實(shí)用。
注意:該試劑盒對脂褐素造成的組織自發(fā)熒光無效。
● 試劑盒組成:?
a. Vector?TrueVIEW? Reagent A 5ml?b. Vector?TrueVIEW? Reagent B 5ml?c. Vector?TrueVIEW? Reagent C 5ml?d. VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 2ml?e. VECTASHIELD Vibrance Antifade? Mounting Media with DAPI 2ml
其中,貨號SP-8400包含a,b,c,d四個(gè)組分;貨號SP-8500包含a,b,c,e四個(gè)組分
●?產(chǎn)品使用方法:
? | 將ReagentA、B、C以1:1:1的比例混合。(注意混合順序,先將A和B以1:1比例混合10s,再加入C,混勻10s) | ? |
? | 將混好后的TrueView試劑滴加到組織樣本切片上,將樣本完全覆蓋,孵育2-5min | ? |
? | 使用PBS緩沖液洗片5次,除去多余緩沖液,VECTASHIELD?Vibrance Media封片后觀察 | ? |
●?產(chǎn)品特征?
A 顯著降低背景染色并保留特異性抗原染色;?B 提高信噪比;?C 產(chǎn)品穩(wěn)定,儲存在滴瓶中,使用方便;?D 操作簡單,快速;整個(gè)染色過程僅需2-5min;?E 為使用者提供清晰、明確、真實(shí)的染色結(jié)果;?F 適用于多種熒光染料的自發(fā)熒光去除,包括Alexa488,Alexa 594,DyLight 488,DyLight 594,F(xiàn)ITC,Cyanine 5和GFP;
G SP-8500試劑盒中的封片劑中DAPI濃度較高,可對細(xì)胞核進(jìn)行清晰的染色。
●?產(chǎn)品對自發(fā)熒光淬滅效果:
◆?右圖為經(jīng)Vector?TrueVIEW?kit處理后,人腎臟組織切片中自發(fā)熒光淬滅的百分比與處理時(shí)間之間的關(guān)系。?◆?Note:2分鐘內(nèi)即可達(dá)到最大淬滅效果。 | ? |
●?產(chǎn)品應(yīng)用舉例:??
> 案例一
未經(jīng)任何處理 | 使用Vector?TrueVIEW?處理 |
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◆ 上圖為人脾臟組織染色結(jié)果:使用VectaFluor TM Duet試劑盒(DK-8818)檢測的mouse anti-CD20(red)和rabbit anti-Ki67(green)對人脾組織切片的染色。?◆?左圖為未經(jīng)任何處理的染色結(jié)果,?◆?右圖為使用TrueVIEW?Autofluorescence Quenching試劑盒染色結(jié)果。于未經(jīng)處理的染色結(jié)果相比,經(jīng)TrueVIEW?Autofluorescence Quenching試劑盒處理后,自發(fā)熒光顯著減少。 |
>?案例二
? | ◆?A-D圖為人腎臟切片(石蠟切片)染色結(jié)果,實(shí)驗(yàn)中使用anti-AE1 /AE3抗體對角蛋白進(jìn)行染色(綠色)?!?A圖未經(jīng)處理,?◆?B-D圖經(jīng)TrueVIEW?Quencher Kit處理。自發(fā)熒光明顯減弱。延長曝光時(shí)間,陽性信號強(qiáng)度也隨之增強(qiáng)。 |
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>?案例三
未經(jīng)任何處理 | 使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI處理 |
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◆?上圖為人胰腺組織染色結(jié)果:綠色為insulin的染色。 ◆?左圖為未經(jīng)任何處理的染色結(jié)果, ◆?右圖為使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI(SP-8500)試劑盒染色結(jié)果。與未經(jīng)處理的染色結(jié)果相比,經(jīng)該試劑盒處理后,自發(fā)熒光顯著減少,核染色顯著增強(qiáng)。 |
>?案例四
未經(jīng)處理(內(nèi)源性自發(fā)熒光)?? | 經(jīng)TrueVIEW?Quencher Kit處理 |
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Company A | Company B | Company C |
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Copper Sulfate Solution | Sodium Borohydride | Sudan Black B |
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●?產(chǎn)品訂購信息?Vector??True VIEW? Autofluorescence Quenching Kit
詳情請咨詢?Vectorlabs?中國獨(dú)家代理-?欣博盛生物科技
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