膠原抗體誘導(dǎo)小鼠關(guān)節(jié)炎模型之CAIA實(shí)驗(yàn)方案

2023-06-29

瀏覽次數(shù)： 177

PROTOCOL TO INDUCE CAIA

CAIA實(shí)驗(yàn)方案

Chondrex公司建議尾靜脈注射單克隆抗體合劑。對(duì)于易感品系，可采用腹腔注射，但是通過(guò)腹腔注射CAIA誘發(fā)的炎癥嚴(yán)重程度往往較低，關(guān)節(jié)炎持續(xù)時(shí)間也較短。請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇合適的實(shí)驗(yàn)方案。

Catalog Number	Amount
53100	100mg
53040	40mg
53010

A. Inducing CAIA without LPS

膠原抗體誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎

在易感品系DBA/1和Balb/c小鼠中采用CAIA建立關(guān)節(jié)炎模型，根據(jù)動(dòng)物供應(yīng)商，動(dòng)物周齡和體積大小的不同，每只小鼠需注射6-10mg單克隆抗體合劑。例如，初次注射免疫5mg抗體合劑后24小時(shí)再次注射5mg抗體合劑。關(guān)節(jié)炎會(huì)在二次免疫后的24-48小時(shí)后發(fā)生。研究員需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼{(diào)整實(shí)驗(yàn)方案。

B. Inducing CAIA with LPS?

膠原抗體聯(lián)用LPS誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎

細(xì)菌毒素LPS（B細(xì)胞分裂素）， MAM(支原體產(chǎn)生的T細(xì)胞分裂素)或SEB(金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的T 細(xì)胞分裂素)和膠原抗體在誘發(fā)關(guān)節(jié)炎中具有協(xié)同效應(yīng)。在這些毒素的存在下，誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎的抗體合劑的量可降低。例如，每只小鼠初次免疫注射1.5mg抗體合劑后第三天注射25-50μgLPS，對(duì)于易感品系小鼠（Balb/c, DBA/1,B10.RIII, and C.B-17 scid/scid mice），關(guān)節(jié)炎的發(fā)生率高達(dá)100%。在C57BL/6小鼠尾部靜脈注射5mg抗體合劑，關(guān)節(jié)炎在初次免疫后第7-10天達(dá)到最嚴(yán)重，可維持兩周。在初次免疫第10或14天注射25-50μgLPS, 關(guān)節(jié)炎會(huì)持續(xù)惡化。盡管三周后炎癥反應(yīng)有所緩解，關(guān)節(jié)破壞是永久性的，甚至導(dǎo)致關(guān)節(jié)強(qiáng)直。

EVALUATING ARTHRITIS

關(guān)節(jié)炎評(píng)估

關(guān)節(jié)炎可通過(guò)臨床評(píng)分來(lái)定性評(píng)估或用測(cè)厚儀來(lái)測(cè)量爪子厚度來(lái)評(píng)估。由于小鼠的爪子太小，因此無(wú)法像測(cè)量大鼠爪子體積那樣通過(guò)浸沒(méi)法測(cè)定小鼠爪子體積。

Chondrex公司提供以下評(píng)分系統(tǒng)（表二）

表二關(guān)節(jié)炎炎癥程度的臨床評(píng)分

得分	發(fā)病情況
0	Normal 正常
1	Mild, but definite redness and swelling of the ankle or wrist, or apparent redness and swelling limited to individual digits, regardless of the number of affected digits? 輕度的、踝關(guān)節(jié)、腕關(guān)節(jié)發(fā)紅、腫脹
2	Moderate redness and swelling of ankle or wrist 踝關(guān)節(jié)或腕關(guān)節(jié)中度發(fā)紅腫脹
3	Severe redness and swelling of the entire paw including digits 爪子嚴(yán)重發(fā)紅、腫脹，包括指端
4	Maximally inflamed limb involving multiple joints 四肢最大程度發(fā)炎，包括多關(guān)節(jié)