很多科研的老師在做ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)，往往對(duì)怎么選擇一款合適的ELISA試劑盒感到困惑，比如說(shuō)我應(yīng)該選擇什么指標(biāo)的？應(yīng)該選擇什么種屬標(biāo)本的？怎么選擇靈敏度/標(biāo)曲這些？今天，小欣就整理了ELISA產(chǎn)品相關(guān)要素，助力您在五分鐘之內(nèi)掌握篩選一款適合自己實(shí)驗(yàn)的ELISA試劑盒。
ELISA產(chǎn)品選擇要素
1.根據(jù)實(shí)驗(yàn)物種及待檢樣品性質(zhì)來(lái)選擇
種屬：人、小鼠、大鼠、雞、牛、猴等；
樣本類型：血清、血漿、組織培養(yǎng)上清、組織或細(xì)胞裂解物。
2.根據(jù)樣品中檢測(cè)物水平選擇
寬動(dòng)力學(xué)檢測(cè)范圍：對(duì)樣品種待測(cè)物水平?jīng)]有任何參考數(shù)據(jù)；
高靈敏度試劑盒：待檢物含量很低。
3.根據(jù)樣本可獲得性來(lái)選擇
通常商品化試劑盒的樣品用量在50ul或100ul，也有部分用量可以少至20ul。
1.供應(yīng)商資質(zhì)評(píng)估
同行口碑、文獻(xiàn)引用、品牌歷史。
2.試劑盒關(guān)鍵技術(shù)參數(shù)
加標(biāo)回收率、精密度、靈敏度等。
當(dāng)然傳說(shuō)中的八大質(zhì)控指標(biāo)，也是一項(xiàng)可供參考的內(nèi)容。
欣博盛生物的每款試劑盒，都會(huì)附帶隨貨說(shuō)明書(shū)，可助大家更詳細(xì)的了解該產(chǎn)品的情況，并且我們公司也有專門的技術(shù)同事可協(xié)助解決技術(shù)上的難題，實(shí)驗(yàn)室的老師也會(huì)對(duì)大家的實(shí)驗(yàn)問(wèn)題進(jìn)行解惑。如果大家購(gòu)買了我們欣博盛ELISA試劑盒，有任何疑問(wèn)，都可以聯(lián)系我們把問(wèn)題給解決掉。
1.回收率
將已知的低、中、高濃度的重組蛋白摻入到待測(cè)樣本中，摻入前后測(cè)到的濃度增加部分與摻入濃度之比就是回收率，以此驗(yàn)證檢測(cè)的準(zhǔn)確度。復(fù)雜的樣本基質(zhì)，如血清、血漿中可能含有干擾因子，影響準(zhǔn)確定量目標(biāo)分析物。優(yōu)秀的ELISA試劑盒回收率通常在80-120%之間（視為無(wú)可計(jì)量的基質(zhì)干擾），合格試劑盒在60%左右。
2.稀釋線性
樣本稀釋后，最終分析物濃度應(yīng)該相同，這個(gè)就是公認(rèn)的實(shí)驗(yàn)線性。干擾因子會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的線性，除非在研發(fā)環(huán)節(jié)克服這些干擾效應(yīng)。我們?yōu)槊總€(gè)驗(yàn)證過(guò)的樣本類型用試劑自帶的稀釋液進(jìn)行系列稀釋。結(jié)果用檢測(cè)值和理論值的百分比表示，線性介于80-120%為理想結(jié)果。
3.精密度
在相同條件下，對(duì)被測(cè)量物(高、中、低濃度)進(jìn)行多次反復(fù)測(cè)量，測(cè)得值之間的一致（符合）程度。這一特性具有重要意義：
保證一項(xiàng)試驗(yàn)中得到的結(jié)果是準(zhǔn)確的，并且一次實(shí)驗(yàn)到下一次實(shí)驗(yàn)結(jié)果可重復(fù)；
判定兩個(gè)結(jié)果相同還是不同。
通常用變異系數(shù)（coefficient of variation, CV）來(lái)表示。優(yōu)秀ELISA試劑盒的酶標(biāo)板內(nèi)變異系數(shù)（CV）小于5%，酶標(biāo)板間變異系數(shù)小于8%。
4.校準(zhǔn)
每個(gè)試劑盒包含的標(biāo)準(zhǔn)品都經(jīng)過(guò)高純度蛋白的校準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量是通過(guò)與母校準(zhǔn)品進(jìn)行比較而制定。用于保證不同批次間試劑盒的一致性，所有批次的試劑盒均經(jīng)過(guò)母校準(zhǔn)品校對(duì)，不會(huì)出現(xiàn)結(jié)果偏差。
5.特異性
抗體是特異的,只與相應(yīng)抗原反應(yīng)。實(shí)際制備的抗體卻常有非特異性反應(yīng)，這是因?yàn)榭乖患冊(cè)斐傻?。多組分抗原之間存在共同的抗原決定簇，或者兩個(gè)抗原決定簇結(jié)構(gòu)類似能與同一抗體結(jié)合，均可出現(xiàn)抗體與異源抗原的交叉反應(yīng)。
ELISA試劑盒包含的試劑（見(jiàn)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)或隨貨說(shuō)明書(shū)）
以小鼠白介6試劑盒為例（Mouse IL-6 ELISA），我們?cè)噭┖兄饕M成部分分別是：抗體預(yù)包被酶標(biāo)板、凍干標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液、濃縮生物素化抗體、濃縮酶結(jié)合物、酶結(jié)合物稀釋液、濃縮洗滌液、顯色底物、反應(yīng)終止液、封板膠紙、產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)等十二個(gè)成分。
看完本文，如果大家對(duì)于怎么選擇一款合適的ELISA試劑盒還有疑問(wèn)的話，可以咨詢我們的在線客服，尋求幫助哦。
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