細菌是廣泛存在的單細胞微生物。它們的直徑通常只有幾微米,形狀各異,從球狀、棒狀到螺旋狀。細菌是細胞培養(yǎng)中最常見的生物污染物14, 15。盡管可以用光學(xué)顯微鏡進行檢測,在污染的早期階段,細菌很容易被誤認為是細胞碎片。
常見的細菌污染“嫌疑者”
在污染的早期,細菌很容易被誤認為是細胞碎片。
細菌污染的源頭:
1.實驗室操作人員葡萄球菌的主要源頭。
2.臟水浴、恒溫箱、玻璃器皿等 假單胞菌和黃桿菌的主要源頭。
3.從動物組織分離出的細胞 共生菌群和/或無癥狀感染的源頭。
細菌污染的檢測
在污染的早期階段,因為細菌(10-100μm)比真核細胞(1-10μm)小得多,它們可能被誤認為是細胞碎片。因此,在顯微鏡下使用相位對比(100x-400x)檢查細胞培養(yǎng)非常重要。
您有沒有看到小黑點、棒狀物、螺旋狀物?它們可以是單獨存在、成鏈存在、或者成簇存在?它們是能活動的嗎?如果答案是肯定的,您的細胞培養(yǎng)可能受到了污染。
由于細菌生長速度快,它們能在48小時內(nèi)引起培養(yǎng)基的變化,細菌污染從105 CFU/ml起變得肉眼可見,培養(yǎng)基呈渾濁狀態(tài)。細菌代謝導(dǎo)致培養(yǎng)基pH值下降,如果含有酚紅,培養(yǎng)基會從紅色變到黃色表
示pH值下降。最終,培養(yǎng)環(huán)境不再適合真核細胞導(dǎo)致其死亡。
這些受污染的培養(yǎng)物應(yīng)該被丟棄,但如果它們是不可替代的話,可使用InvivoGen的復(fù)合抗生素處理。
預(yù)防污染試劑
Normocin?
??廣譜:殺滅支原體、細菌和真菌
? 安全:對哺乳動物細胞毒性極低
Normocin?是包含三種抗生素的創(chuàng)新配方,具有抗支原體、細菌(革蘭氏陽性和革蘭氏陰性)和真菌(包括酵母)的活性。它被廣泛使用及引用為細胞培養(yǎng)基中的“常規(guī)添加物”來防止污染。Normocin?可與青霉素和鏈霉素(Pen-Strep)溶液結(jié)合使用,以擴大抗菌譜。Normocin?能提供最大限度的保護,并以最低的細胞毒性防止微生物污染。
多重耐藥細菌去除劑
Normocure?
??隨時可用:直接添加到培養(yǎng)瓶
??快速:3次傳代內(nèi)拯救細胞培養(yǎng)
??安全:對哺乳動物細胞毒性極低
Normocure?是從革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細菌,特別是抗青霉素和鏈霉素的非發(fā)酵革蘭氏陰性細菌中拯救寶貴細胞系的最佳武器。Normocure?是由三種抗生素家族的成分組成的混合物。通
過一次傳代就可以清除99%以上的細菌污染物。這些抗生素的靶點不存在于真核細胞,保證了Normocure?的低細胞毒性。
溫馨提示:所有InvivoGen的細胞系都配備了Normocin?,它是一種廣譜的抗菌劑,幫助您保護細胞的安全。
原代細胞抗微生物劑
Primocin?
? 廣譜:殺滅支原體、細菌和真菌
? 安全:對原代細胞無毒
Primocin?含有四種化合物,其中三種阻止了革蘭氏陽性細菌、革蘭氏陰性細菌和支原體的DNA和蛋白質(zhì)合成。第四種化合物通過破壞細胞膜的離子交換來根除真菌,包括酵母。Primocin?已成功用于許多原代細胞,包括鼠源和人源腫瘤源細胞系、胚胎細胞和誘導(dǎo)性多能干細胞。
有關(guān)細菌污染產(chǎn)品的常見問題:
問:你們的抗微生物試劑會否干擾篩選抗生素?
答:不會,它們不干擾常見的篩選抗生素,如G418、殺稻瘟素(Blasticidin)、嘌呤霉素(Puromycin)、潮霉素 B (Hygromycin B)或 Zeocin?。
問:我們的培養(yǎng)物有細菌污染,但無法確定是哪種菌株。要確保消除細菌,應(yīng)該選擇哪個產(chǎn)品?
答:我們強烈推薦使用Normocure?,它是一種廣譜抗菌劑,對革蘭氏陽性或陰性細菌非常有效。Normocure?可以拯救被環(huán)境細菌(如葡萄球菌屬和無色桿菌屬)污染的細胞培養(yǎng)物。
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相關(guān)文獻:
— Magupalli V. G. et al., 2020. Science. HDAC6 mediates an aggresome-like mechanism for NLRP3 and pyrin inflammasome activation. DOI: 10.1126/science.
aas8995.
— Polyzoz A. A. et al., 2019. Cell Metab. Metabolic Reprogramming in Astrocytes Distinguishes Region-Specific Neuronal Susceptibility in Huntington Mice.?
DOI: 10.1016/j.cmet.2019.03.004.
— Ganesh K. et al., 2020. Nat. Cancer. L1CAM defines the regenerative origin of metastasis-initiating cells in colorectal cancer. DOI: 10.1038/s43018-019-0006-x
預(yù)防/去除細菌污染的相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品說明 | 規(guī)格 | 貨號 |
Normocin? | Reagent for preventing microbial contamination | 500 mg (10 x 1 ml) 1 g (1 x 20 ml) | ant-nr-1 ant-nr-2 |
Normocure? | Microbial contamination elimination reagent | 100 mg (2 x 1 ml) | ant-noc
|
Primocin? | Reagent for preventing microbial contamination in primary cells
| 500 mg (10 x 1 ml)? 1 g (1 x 20 ml)
| ant-pm-1? ant-pm-2 |
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