一、唾 液
在唾液樣本采集之前，受試者被建議不要吃東西、抽煙或喝飲料。用鹽水徹底漱口后，采集唾液3 mL。立即以4000 rpm的速度離心15分鐘，以除去任何顆粒或沉積物。將上清液分裝并在?70°C下儲存?zhèn)溆谩?/p>
? 參考文獻(xiàn)：
Aydin, S., I. Halifeoglu, I. H. Ozercan, F. Erman, N. Kilic, S. Aydin, N. Ilhan, N. Ilhan, Y. Ozkan, N. Akpolat, L. Sert and E. Caylak (Aydin, Halifeoglu et al.). 'A comparison of leptin and ghrelin
levels in plasma and saliva of young healthy subjects.' Peptides 26(4): 647-652.
二、痰 液
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案收集并制備誘導(dǎo)痰：1）分離粘液，2）測量粘液，3）添加與粘液相同體積的二硫蘇糖醇（0.1%），4）渦流，5）使用濾紙并收集過濾液，6）300 g離心30?min，7） 分離上清液并保持在?20°C。
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Majd, A. M. M., S. Faghihzadeh, S. Pourfarzam, M. Eghtedardoost, D. Jamali, E. S. Mirsharif, R. Dilmaghanian and T. Ghazanfari (2019). 'Serum and sputum levels of IL-17, IL-21, TNFalpha and mRNA expression of IL-17 in sulfur mustard lung tissue with long term pulmonary complications (28years after sulfur mustard exposure).' Int Immunopharmacol 76: 105828.
三、尿 液
早上7點(diǎn)到8點(diǎn)，用無菌管收集第一次晨尿，存于-80°C備用。離心20分鐘左右（2000-3000 rpm）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
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Wasilewska, A., K. Taranta-Janusz, W. Debek, W. Zoch-Zwierz and E. Kuroczycka-Saniutycz. 'KIM-1 and NGAL: new markers of obstructive nephropathy.' Pediatr Nephrol 26(4): 579-586.
四、精 液
應(yīng)在禁欲至少2天和最多7天之后收集樣本。如果需要額外的樣本，每次訪視時禁欲天數(shù)應(yīng)盡可能恒定。樣本應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室附近的房間內(nèi)收集，以限制精液的溫度波動，并控制采集和分析之間的時間間隔（例外情況見第2.2.5節(jié)和第2.2.6節(jié)）。
應(yīng)通過手淫獲得樣本，并將其射入一個無菌并確認(rèn)對精子無毒的廣口玻璃或塑料容器中。樣本容器應(yīng)保持在20°C到37°C之間的環(huán)境溫度，以避免溫度發(fā)生較大變化，這可能會影響精子射入后的情況。
正常精液射出體外呈稠厚的膠凍狀，射出體外后需在室溫或37°C水浴箱中使其在前列腺分泌的纖維蛋白溶解酶的作用下液化，變的稀薄。待精液完全液化后，將精液 4000 rpm 離心 10 分鐘分離精漿進(jìn)行檢測。
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五、肺 泡 灌 洗 液
1. 在纖支鏡下，按常規(guī)方法行支氣管肺泡灌洗。每次注入無菌生理鹽水20 ml，然后緩慢洗出，每例注入總量約200 ml，其回收率50-60%?；厥辗闻莨嘞匆?，1000 rpm離心10分鐘，取上清分裝-80°C凍存?zhèn)溆谩?/p>
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2. BALF樣本從進(jìn)行呼吸道癥狀常規(guī)調(diào)查的患者身上采集。對樣本進(jìn)行離心和無菌過濾，以去除細(xì)胞碎片和結(jié)核分枝桿菌
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Singh, S., G. Maniakis-Grivas, U. K. Singh, R. M. Asher, F. Mauri, P. T. Elkington and J. S. Friedland (2018). 'Interleukin-17 regulates matrix metalloproteinase activity in human pulmonary tuberculosis.' J Pathol 244(3): 311-322.
六、腦 脊 液
腦脊液的研究文獻(xiàn)中，很多對如何取腦脊液沒有詳細(xì)描述?？赡苁且?yàn)閷儆谛袠I(yè)常規(guī)操作，不必贅述?？蓪τ谛聦W(xué)者，往往很是疑惑。我們百度了一下，結(jié)果如下，僅供參考：
人腦脊液的抽?。号R床上都用的是腰椎穿刺術(shù)。具體的方法是將患者左側(cè)臥位，屈頸、屈髖、屈膝，取腰3、4為穿刺點(diǎn)，經(jīng)過常規(guī)的消毒鋪巾以后，在腰3、4的位置局部浸潤麻醉，將腰穿針插入，當(dāng)腰穿針進(jìn)入蛛網(wǎng)膜下腔以后，把腰穿針中間的針芯抽出，即可流出澄清或者是有顏色、有病變的腦脊液。但是在抽取腦脊液之前需要測量腦脊液的壓力，然后再留取腦脊液，腦脊液留取的過程中要注意速度要緩慢，并且量要根據(jù)顱內(nèi)壓的狀況進(jìn)行具體的調(diào)節(jié)，不宜過多也不宜過少。樣本收集后于 1000g 離心 20 分鐘，離心后收集上清，并將標(biāo)本保存于-20度，且應(yīng)避免反復(fù)凍融。
大小鼠的腦脊液量都不多，尤其是小鼠的，通常只能有幾微升。我們實(shí)驗(yàn)室的做法是用一根胰島素注射器前面再連接一根比較細(xì)的透明管子，管子的另一端與折下的胰島素注射器針頭連接。準(zhǔn)備好工具，深麻老鼠后，我們只需要找到老鼠的枕骨大孔，讓針頭垂直于枕骨的角度插入枕骨大孔。不要插入太深，當(dāng)手指有破空感的時候就停止，然后用胰島素注射器緩慢回抽（由于大小鼠的腦脊液很少，回抽的力度應(yīng)很小，速度不應(yīng)快，防止腦內(nèi)壓增大）。腦脊液是無色透明的液體，如果透明管子里的液體是紅色的，或者談紅色的，那說明你出錯了，重新再來。當(dāng)大小鼠的腦脊液抽完后，你就可以在透明管子中看到清澈的腦脊液從某一段突然變紅了。這個時候用止血鉗夾住紅色段的上緣，接著用剪刀沿剪去紅色的部分。這樣就可以取到?jīng)]受血液污染的腦脊液了。樣本收集后于 1000g 離心 20 分鐘，離心后收集上清，并將標(biāo)本保存于-20度，且應(yīng)避免反復(fù)凍融。
七、胸 水
患者經(jīng)胸腔穿刺取胸腔積液10 mL于無菌管內(nèi)。3000 g下離心10分鐘，上清液在?80°C下凍存?zhèn)溆谩?/p>
? 參考文獻(xiàn)：
Hong, J. Y., S. Y. Park, Y. Kim, C. Y. Lee and M. G. Lee (2018). 'Calpain and spectrin breakdown products as potential biomarkers in tuberculous pleural effusion.' J Thorac Dis 10(5): 2558-2566.
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