細(xì)胞周期Cell cycle是指從一次細(xì)胞分裂形成子細(xì)胞開始到下一次細(xì)胞分裂形成子細(xì)胞為止所經(jīng)歷的過程，反映細(xì)胞增殖的速度。

一個完整的細(xì)胞周期包含間期和分裂期（M期）兩個階段。間期又分為DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）和DNA合成后期（G2期），處于不同時期的細(xì)胞的DNA含量存在差異。一般認(rèn)為，G1期細(xì)胞具有增殖活性，參與細(xì)胞周期循環(huán)，是二倍體細(xì)胞；S期細(xì)胞，DNA 含量逐漸增加，從二倍體變成四倍體，隨后進(jìn)入G2期，最終進(jìn)入M期。研究表明，細(xì)胞周期檢測分析對人腫瘤的診斷預(yù)后具有很高的價值。

檢測細(xì)胞周期常用的方法是檢測DNA含量，可以選擇能與DNA結(jié)合的熒光染料（如PI等），再根據(jù)細(xì)胞各個時期DNA含量不同從而熒光強度不同的方法，分析各個階段的細(xì)胞比例。

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流式細(xì)胞術(shù) / 細(xì)胞周期檢測

當(dāng)天檢測的活細(xì)胞樣本

( 1 ) 收集2×105 - 1×106個細(xì)胞，離心棄上清。用PBS洗滌一次，離心棄上清。

( 2 ) 加入1mL DNA staining solution和10μL Permeabilization solution，渦旋振蕩5 - 10秒混勻。室溫避光孵育30分鐘。

( 3 ) 選擇最低上樣速度，在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行檢測。如需在熒光顯微鏡下觀察，則離心細(xì)胞，棄上清，加入新鮮緩沖液重懸。滴加1滴細(xì)胞懸液至載玻片，蓋上蓋玻片后使用合適的濾光片進(jìn)行觀察。

當(dāng)天無法檢測的活細(xì)胞樣本

( 1 ) 按照下述方法固定，或其他合適的方法固定

(a) 收集2×105 - 1×106個細(xì)胞，離心棄上清。輕彈管壁，使沉淀重懸在殘余的液體中，加入1 mL 室溫下的PBS。

(b) 將細(xì)胞緩慢加入3 mL無水乙醇(- 20℃預(yù)冷)中，邊加邊高速攪拌。- 20℃固定過夜，可保存數(shù)月。

( 2 ) 檢測當(dāng)天，將固定細(xì)胞離心，棄去乙醇，輕彈管壁使沉淀松散，加入2 - 5 mL 室溫下的PBS，放置15分鐘使細(xì)胞再次水化。離心，棄上清。

( 3 ) 加入1 mL DNA staining solution，渦旋振蕩5 - 10秒混勻。室溫避光孵育30分鐘。

( 4 ) 選擇最低上樣速度，在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行檢測。如需在熒光顯微鏡下觀察，則離心細(xì)胞，棄上清，加入新鮮緩沖液重懸。滴加1滴細(xì)胞懸液至載玻片，蓋上蓋玻片后使用合適的濾光片進(jìn)行觀察。

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