助力Omicron研究，InvivoGen推出變異株質(zhì)粒

2022-01-06

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Omicron（奧密克戎）新冠變異毒株(Clade 21K/ B.1.1.529(BA.1))來勢洶洶，比其他令人擔憂的變異株具有更高的再次感染風險。這個變體存在大量突變，其中一些是令人擔憂的。為此，InvivoGen推出了Omicron（奧密克戎）變異株假型質(zhì)粒和Omicron（奧密克戎）變異株表達質(zhì)粒，這些質(zhì)粒編碼了Omicron（奧密克戎）變異株的Spike全長序列。

SARS-CoV-2 Spike假型質(zhì)粒-Omicron變異株

InvivoGen提供一系列編碼了各種Spike變異株的pLV-Spike質(zhì)粒，可與包裝質(zhì)粒和GFP報告質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細胞，這些質(zhì)?？梢陨蒘pike假型慢病毒顆粒。假型慢病毒顆粒感染了表達SARS-CoV-2宿主受體的易感細胞系（例如A549-hACE2-TMPRSS2或HEK-Blue? hACE2-TMPRSS2細胞）后，可以通過GFP表達量進行測定。此方法適合于病毒進入研究，并可用于測試抗體和小分子抑制劑的中和潛力。

其中，pLV-SpikeV11編碼了Omicron（奧密克戎）變異株(Clade 21K/ B.1.1.529(BA.1))的Spike全長序列。為了獲得最佳的表達效果。InvivoGen對密碼子進行了優(yōu)化并去除了Cterminal ER-retention signal，該質(zhì)粒可與報告質(zhì)粒和輔助蛋白質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染后產(chǎn)生Spike假型慢病毒顆粒，也可用于SARS-CoV-2抑制劑的篩選。? 助力Omicron研究，InvivoGen推出變異株質(zhì)粒 ?

質(zhì)粒特征

序列參考:?EPI_ISL_6699761.1

密碼子優(yōu)化

ORF大小:?3756 bp

測序引物:
- Forward rbt β-globin intron: TGGTTACAATGATATACACTG
- Reverse rbt?β-globin pAn: CTCAAGGGGCTTCATGATGTC

質(zhì)量控制:
- 質(zhì)粒通過限制性內(nèi)切酶分析和全長開放閱讀框 (ORF) 的測序來確認
- 離子交換色譜純化后，電泳確認超螺旋構(gòu)象

SARS-CoV-2 Spike表達質(zhì)粒-Omicron變異株

pUNO1-SpikeV1和pUNO1-SpikeV11-dfur是專為在哺乳動物細胞中表達SARS-CoV-2 Spike (S)蛋白而設(shè)計的質(zhì)粒，包含含有功能性furin裂解位點或無活性的furin裂解位點兩種形式。為了獲得最佳的表達效果。InvivoGen對這兩個質(zhì)粒的密碼子進行了優(yōu)化并去除了Cterminal ER-retention signal，可用于SARS-CoV-2抑制劑的篩選，包括小分子、單克隆抗體、康復(fù)期血漿。pUNO1-SpikeV11含有功能性furin裂解位點，推薦用于Spike/ACE2細胞融合實驗；pUNO1-SpikeV11-dfur含有無活性的furin裂解位點，推薦用于流式細胞術(shù)檢測細胞表面。

質(zhì)粒特征

貨號	pUNO1-SpikeV11	pUNO1-SpikeV11-dfur
序列參考	EPI_ISL_6841980	EPI_ISL_6841980
	密碼子優(yōu)化	密碼子優(yōu)化和R683/5A突變
ORF大小	3756 bp	3756 bp
測序引物	- Forward HTLV 5’UTR: TGCTTGCTCAACTCTACGTC - Reverse SV40 pAn: AACTTGTTTATTGCAGCTT	- Forward HTLV 5’UTR: TGCTTGCTCAACTCTACGTC - Reverse SV40 pAn: AACTTGTTTATTGCAGCTT
質(zhì)量控制	-質(zhì)粒通過限制性內(nèi)切酶分析和全長開放閱讀框 (ORF) 的測序來確認 -離子交換色譜純化后，電泳確認超螺旋構(gòu)象