支原體是最小和最簡單的自我復(fù)制生命體。由于支原體體積?。?00 nm），缺乏剛性的細(xì)胞壁，因此肉眼無
法檢測到支原體，它們可以透過一般過濾膜，并對很多抗生素都具有抵抗力。支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)中的一
個主要問題，不止影響實驗結(jié)果的有效性，更會影響細(xì)胞工程制藥的質(zhì)量和安全性。
支原體的特征
支原體屬于柔膜菌綱，其成員特征為缺乏細(xì)胞壁以及擁有多變的形態(tài)。支原體對包括原代細(xì)胞在內(nèi)的所有真核細(xì)胞類型具有高度傳染性。成百上千的支原體可以附著在一個細(xì)胞上，與細(xì)胞膜融合、繁殖，最終數(shù)量可以超過培養(yǎng)細(xì)胞1000倍。支原體可以徹底改變細(xì)胞特性和扭曲研究結(jié)果。而支原體脂蛋白可被Toll樣受體2（TLR2）識別并激活免疫細(xì)胞3。支原體沒有細(xì)胞壁的特點使它們對常用的抗生素（如青霉素和鏈霉素）產(chǎn)生抗性。此外，它們的尺寸微?。▇100nm），能夠穿透過0.2μm的標(biāo)準(zhǔn)過濾膜。因此，我們需要采取預(yù)防措施來防止細(xì)胞培養(yǎng)物受到污染。
支原體污染對細(xì)胞功能的主要影響
支原體與宿主細(xì)胞競爭營養(yǎng)素和代謝物前體。因此，它們能改變許多細(xì)胞功能，影響到細(xì)胞代謝和細(xì)胞生長，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。通過對受污染的人源細(xì)胞進(jìn)行微陣列分析，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)支原體嚴(yán)重影響數(shù)百個基因的表達(dá)，當(dāng)中包括受體、離子通道、生長因子和致癌基因4。一旦與宿主細(xì)胞膜粘附或融合，支原體可以通過干擾信號級聯(lián)和細(xì)胞因子產(chǎn)生，進(jìn)一步損害細(xì)胞5。這些有害效應(yīng)會強(qiáng)烈干擾實驗數(shù)據(jù)，導(dǎo)致研究結(jié)果無
效，特別是當(dāng)涉及表達(dá)TLR2的免疫細(xì)胞時，如巨噬細(xì)胞。
支原體污染的檢測
InvivoGen提供兩種支原體檢測方法，令您能夠及時抵御細(xì)胞污染。兩種試劑均可快速和準(zhǔn)確地檢測出最常污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體物種。
MycoStrip?是一種能夠“即時”（?1小時）檢測支原體基因組的免疫層析試紙，而PlasmoTest?是基于檢測支原體脂蛋白的比色細(xì)胞分析法。
基因檢測試紙條
MycoStrip?
??適合用于即時測試
??簡單：無需特殊設(shè)備
??快速：實際操作時間<15分鐘，總時長約1小時
??清晰：一條條帶 - 支原體陰性?
?兩條條帶 - 支原體陽性
MycoStrip?基于等溫PCR的技術(shù)，在加入我們專有的反應(yīng)混合物后，靶向擴(kuò)增細(xì)胞培養(yǎng)中，最常見（占95％）支原體物種的16S rRNA基因。在5分鐘內(nèi)免疫層析試紙條的顯示區(qū)上就會出現(xiàn)檢測結(jié)果的條帶。
| 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品說明 | 規(guī)格 | 貨號 |
| MycoStrip? | Mycoplasma contamination
detection kit (strips) | 10 tests 20 tests? 50 tests | rep-mys-10? rep-mys-20? rep-mys-50 |
細(xì)胞比色分析法
PlasmoTest?
??適合常規(guī)測試使用
??簡單：使用細(xì)胞培養(yǎng)上清液進(jìn)行比色檢測
??快速：操作時間<1小時。過夜培養(yǎng)后可見結(jié)果
??靈敏：培養(yǎng)上清液中檢測限為 5.10（2次方） - 5.10（5次方） CFU/ml
InvivoGen擁有專利的HEK-Blue?-2細(xì)胞，穩(wěn)定表達(dá)人源TLR2（支原體脂蛋白的主要識別受體1
）,以及一個NF-κB誘導(dǎo)的分泌型胚胎堿性磷酸酶（SEAP）報告基因。HEK-Blue?-2細(xì)胞可直接在HEK-Blue?檢測培養(yǎng)基中培養(yǎng)，便于檢測，是常規(guī)檢測的理想選擇。簡單向這些細(xì)胞添加測試樣品則可以得到比色結(jié)果，其靈敏度與基于生物化學(xué)發(fā)光的分析法相近。培養(yǎng)上清液樣品中SEAP報告基因的活性可使用分光光度計在620-655nm下測量。而吸光度與污染物的量成正比。為了您的方便，HEK-Blue?-2細(xì)胞會附送Normocin?。Normocin?是一種抗生素混合物，能夠防止細(xì)胞培養(yǎng)受到支原體、細(xì)菌和真菌的污染。
| 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品說明 | 規(guī)格 | 貨號 |
| PlasmoTest? | Mycoplasma contamination detection kit (cells) | 1 kit (250 tests) | rep-pt1 |
| PlasmoTest? Controls | Controls for PlasmoTest? detection kit | 200 tests | pt-ctr2 |
| PlasmoTest? Refills | Reagents for PlasmoTest? detection kit | 500 samples | rep-ptrk |
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