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首批商業(yè)投產(chǎn)α-突觸核蛋白寡聚體

2021-11-19
瀏覽次數(shù): 166

Stressmarq首批商業(yè)投產(chǎn)α-突觸核蛋白寡聚體優(yōu)勢(shì):

  • 高含量α-突觸核蛋白寡聚體

  • 動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定 (kinetically stable/trapped)

  • 不含任何誘導(dǎo)劑或抑制劑 (多巴胺,EGCG)

  • 可用于活性電泳 (Native PAGE),體內(nèi)體外檢測(cè)及疾病建模

  • 全球獨(dú)家量產(chǎn)


首批商業(yè)投產(chǎn)α-突觸核蛋白寡聚體

左圖為動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定(kinetically stable) 的α-突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 電鏡圖。該寡聚體沒(méi)有使用任何誘導(dǎo)劑或抑制劑來(lái)鎖定寡聚體狀態(tài),并且寡聚體含量能達(dá)到90%。


SPR-484 的負(fù)染色透射電子顯微鏡圖像在 80 Kv 下使用磷鎢酸和醋酸鈾染色在碳涂層的 400 目銅網(wǎng)格上獲得。可以清晰的看到寡聚體結(jié)構(gòu),并且具有很高的均勻性。


首批商業(yè)投產(chǎn)α-突觸核蛋白寡聚體

動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定的α突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 可在凍融后37℃下孵育兩周仍然穩(wěn)定


(A)凍融一次后的動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定寡聚體的Native PAGE

(B)和(C)分別是凍融一次后的和37℃孵育兩周后的尺寸排阻色譜(SEC)


在峰值處,90%SPR-484在凍融后37℃下孵育兩周仍然穩(wěn)定于寡聚體狀態(tài)



首批商業(yè)投產(chǎn)α-突觸核蛋白寡聚體

動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定的α突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 對(duì)多巴胺能神經(jīng)元有毒性并且可以誘發(fā)帕金森病理現(xiàn)象(pSer129)


(A) 經(jīng)寡聚體處理后 11 天,大鼠原代多巴胺能神經(jīng)元的存活率由抗 MAP2 抗體量化并表示為對(duì)照的百分比

(B) 經(jīng)寡聚體處理后 11 天,大鼠原代多巴胺能神經(jīng)元中存在的 α-突觸核蛋白 pSer129 水平通過(guò)抗 α-突觸核蛋白 pSer129 抗體與抗 MAP2 抗體的比率量化,表示為對(duì)照的百分比


所有數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)驗(yàn)證,而非偶然性結(jié)果


首批商業(yè)投產(chǎn)α-突觸核蛋白寡聚體

動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定的α突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 在大鼠原代多巴胺能神經(jīng)元中誘導(dǎo)帕金森相關(guān)的pSer129病理現(xiàn)象


(A)用對(duì)照PBS緩沖液處理后11天的大鼠原代多巴胺能神經(jīng)元

(B) 用10 μg/mL SPR-484處理后11天的大鼠原代多巴胺能神經(jīng)元


細(xì)胞核染色藍(lán)色(Hoechst),多巴胺能神經(jīng)元顯示紅色(MAP2),病理現(xiàn)象為綠色(α-syn pSer129)


注:SPR-484為E.coli 表達(dá)的,在加入神經(jīng)元之前沒(méi)有磷酸化


其他類(lèi)型的α-突觸核蛋白:

首批商業(yè)投產(chǎn)α-突觸核蛋白寡聚體

電鏡圖來(lái)自維多利亞大學(xué) (1型, 纖絲) 和英屬哥倫比亞大學(xué) (2型, A53T).


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