背景知識
凝集素(Lectins)是動物細(xì)胞和植物細(xì)胞都能夠合成和分泌的、能與糖結(jié)合的蛋白質(zhì)。因其能凝集紅血球（含血型物質(zhì)），故名凝集素。如今，凝集素指所有糖結(jié)合蛋白，不管其是否能凝集紅細(xì)胞。凝集素能識別糖蛋白和糖肽中，特別是細(xì)胞膜中復(fù)雜的碳水化合物結(jié)構(gòu)，即細(xì)胞膜表面的碳脂化合物決定簇。一種凝集素具有對某一種特異性糖基專一性結(jié)合的能力。凝集素在生物識別現(xiàn)象中發(fā)揮作用，涉及細(xì)胞和蛋白的識別，比如：一些病毒利用凝集素將其附著在宿主細(xì)胞上。目前，已經(jīng)在植物、病毒、微生物和動物中發(fā)現(xiàn)了凝集素，但許多生物學(xué)功能仍待探究。
大多數(shù)凝集素為多聚體，由非共價連接的亞基組成。這種多聚化賦予了凝集素凝集細(xì)胞和與糖結(jié)合物形成沉淀的能力(類似于抗原-抗體反應(yīng))。凝集素與糖結(jié)構(gòu)的結(jié)合具有高度的特異性。凝集素與其受體的結(jié)合親和力因其受體糖結(jié)構(gòu)的細(xì)微變化而有較大差異。
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〈〈?凝集素在動物中的作用
凝集素在動物中發(fā)揮不同的生物學(xué)功能，從細(xì)胞黏附到糖蛋白合成的調(diào)控，以及血液中蛋白水平的調(diào)控。
也可與胞外及胞內(nèi)的可溶性糖蛋白結(jié)合。有些凝集素存在于哺乳動物肝細(xì)胞表面，可特異性識別半乳糖(galactose)殘基。這些表面受體的作用在于從循環(huán)系統(tǒng)中清除某些糖蛋白。另外一凝集素也是一個受體，可識別含甘露糖-6-磷酸的水解酶(mannose-6-phosphate), 而將靶蛋白轉(zhuǎn)入溶酶體。
已知，凝集素在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮重要重用，可識別廣泛存在于病原體上的糖。例如凝集素補(bǔ)體活化途徑(complement activation pathway )和甘露糖結(jié)合凝集素(mannose-binding lectin)。
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〈〈?凝集素在植物中的作用
凝集素在植物 (豆科凝集素，Legume lectins) 中的功能仍不確切。植物種子中的凝集素隨植物生長，其濃度大量降低，表明凝集素在植物種子萌發(fā)及種子存活方面發(fā)揮重要作用。
研究發(fā)現(xiàn)，許多植物凝集素識別的并非糖配體，這些配體主要以疏水性配體為主包括腺嘌呤、植物激素、細(xì)胞分裂素、吲哚乙酸，也包括水溶性的植物激素。
凝集素在凝集紅細(xì)胞方面與抗體有類似的能力，但凝集素并非免疫細(xì)胞的組分。
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〈〈?凝集素純化方法
?傳統(tǒng)方法 | 鹽誘導(dǎo)結(jié)晶(salt-induced crystallization)、乙醇沉淀(ethanol ?precipitation)、離子交換層析(Ion exchange chromatography)、凝膠過濾 |
?親和層析 (affinity chromatography) | ? 利用凝集素和糖結(jié)構(gòu)的特異性結(jié)合特性 |
Vectorlabs公司既采用傳統(tǒng)方法也采用親和層析方法。產(chǎn)品經(jīng)多種方法驗證，如抗血清免疫沉淀、凝集滴度、多聚酰胺凝膠電泳、特異性親和柱 結(jié)合活性分析等。
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凝集素結(jié)合特異性指南
?糖 | ?凝集素 |
?Fucose(Fuc) | ?AAL,LTL, UEA I |
?Galactose(GalNAc)? | ?ACL, ECL, EEL, GSL, GSL I-B4, Jacalin, MAL I, PNA, RCA I, ?RCA II, SBA |
?Glucose(Glc) | ?Con A, LCA, PSA |
?Mannose(Man)? | ?Con A, GNL, HHL, LCA, NPL, PSA |
?N-Acetylgalactosamine ?(GalNAc) | ?BPL, DBA, GSL I, MPL, PTL, RCA I, RCA II, SJA, SBA, VVA, WFA |
?N-Acetylglucosamine(GlcNAc) | ?DSL, GSL II,LEL, STL, WGA |
?Sialic Acid(SA) | ?MAL II, SNA |
?Complex Structures | ?PHA-E, PHA-L |
Vectorlabs供應(yīng)凝集素類型?
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〈〈?瓊脂糖結(jié)合凝集素
凝集素親和層析是一種簡廣泛應(yīng)用的用于分離糖復(fù)合物的技術(shù)。糖復(fù)合物與固定的凝集素結(jié)合，未結(jié)合的物質(zhì)被洗掉，再經(jīng)過糖蛋白洗脫液（抑制凝集素的結(jié)合）洗脫即可。
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通過此方法，可分離純化可溶性蛋白、激素、抗原、多糖、洗滌劑可溶性膜結(jié)合糖復(fù)合物,細(xì)胞表面受體、血型物質(zhì)、病毒糖蛋白、組織相容性抗原,淋巴因子、酶、淋巴細(xì)胞標(biāo)記、血清蛋白、胚胎抗原等。
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Vectorlabs選擇親和純化的凝集素，采用耐熱的、交聯(lián)度4%的瓊脂糖珠作為固相基質(zhì)，通過共價結(jié)合的方式，在凝集素和瓊脂糖珠間插入一個親水間隔臂。這種結(jié)合方式可維持凝集素活性，最小化結(jié)合凝集素發(fā)生的構(gòu)象變化，避免可能造成的非特異性離子或疏水反應(yīng)的發(fā)生。
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產(chǎn)品特點(diǎn)
● 最大化保留結(jié)合凝集素的碳水化合物結(jié)合活性
●?在較廣的pH范圍內(nèi)線性穩(wěn)定
●?與瓊脂糖珠結(jié)合的蛋白復(fù)合物不易被Tris或常規(guī)的Buffer洗脫
●?非特異性結(jié)合少
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〈〈?帶標(biāo)記凝集素
某些凝集素經(jīng)高度復(fù)合后仍具有較高的活性，可溶，非特異性結(jié)合低，而有些則不能。
Vectorlabs提供的每個帶標(biāo)記的凝集素具有適當(dāng)數(shù)量的熒光基團(tuán)與或生物素，從而提供了最佳的凝集素染色特性。