alamarBlue?是一種快速、靈敏的細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑,適用于人、動(dòng)物細(xì)胞、細(xì)菌和真菌等多種研究對(duì)象,可用于貼壁細(xì)胞和非貼壁細(xì)胞的檢測(cè)。作為一種無(wú)毒、即用型的試劑,alamarBlue?為細(xì)胞增殖分析提供了一種簡(jiǎn)便、快速、安全、經(jīng)濟(jì)、可靠的方法。
AlamarBlue???的特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)
●?使用簡(jiǎn)單方便:即用型的單組分試劑,只需加入培養(yǎng)基即可檢測(cè)細(xì)胞的增殖狀況;產(chǎn)生的還原產(chǎn)物是水溶性的,與其他常用的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法相比,不需要固定、洗滌、提取的步驟
●?靈活:可通過(guò)分光光度計(jì)或熒光光度計(jì)檢測(cè)
●?性價(jià)比高:可用于高通量分析
●?安全:對(duì)細(xì)胞無(wú)毒、無(wú)害,不影響細(xì)胞代謝、細(xì)胞因子分泌、抗體合成等,對(duì)人體和環(huán)境也無(wú)毒無(wú)害
●?高靈敏:最低可檢測(cè)50個(gè)細(xì)胞
●?穩(wěn)定:適用于對(duì)細(xì)胞增殖狀況的連續(xù)觀察
●?經(jīng)濟(jì):無(wú)需裂解細(xì)胞,細(xì)胞可繼續(xù)培養(yǎng)或用于其他實(shí)驗(yàn)
●?可靠:文獻(xiàn)引用率高,Pubmed有上千篇文獻(xiàn)的引用 ?
AlamarBlue???的應(yīng)用
●?監(jiān)測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖狀態(tài)、研究細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡
●?監(jiān)測(cè)生長(zhǎng)因子活性,評(píng)估生長(zhǎng)因子對(duì)細(xì)胞增殖的影響
●?治療性藥物尤其是腫瘤治療藥物的開發(fā)
●?環(huán)境污染物質(zhì)的評(píng)估,細(xì)胞毒分析
●?抗生素效價(jià)評(píng)估 ?
AlamarBlue???的原理
細(xì)胞增殖過(guò)程中,細(xì)胞體內(nèi)的環(huán)境由氧化環(huán)境變化成還原環(huán)境,呼吸鏈中的NADPH/NADP, FADH/FAD, FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高。alamarBlue?的活性成分resazurin?(刃天青)是一種無(wú)毒、可透膜的藍(lán)色染料,有微弱的熒光性,它作為一種氧化還原指示劑,被細(xì)胞內(nèi)吞后,在細(xì)胞質(zhì)中被以上這些代謝中間體還原,其還原產(chǎn)物resorufin呈現(xiàn)出粉紅色并有很強(qiáng)的熒光性,最后可用普通分光光度計(jì)或熒光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè),吸光度和熒光強(qiáng)度與活性細(xì)胞數(shù)成正比,因而可作為細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性定量檢測(cè)的一個(gè)理想的指示器。
AlamarBlue??的操作流程以及結(jié)果計(jì)算
操作非常簡(jiǎn)單、容易:在培養(yǎng)的細(xì)胞中加入alamarBlue??, 于37°C?孵育1-4小時(shí),然后讀取熒光值或吸光值(熒光檢測(cè)為?530-560 nm?激發(fā),發(fā)射光波長(zhǎng)為590 nm?,或者在?570 nm?和?600 nm用分光光度計(jì)測(cè)定光吸收值)。
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