InvivoGen公司開發(fā)了在能在細胞水平檢測模式識別受體(pattern recognition receptor,PRR)的配體的篩選技術服務,InvivoGen可以從以下不同PRR來篩選您的化合物,以確定與傳染病、自身免疫和癌癥相關的先天免疫信號通路的有效激活劑或抑制劑。
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● TLR Ligand Screening
TLR配體篩選服務利用HEK-Blue TLR cells。這些HEK293衍生的細胞是穩(wěn)定表達人或小鼠TLR基因的NF-kB-SEAP報告細胞。表達的TLR基因是TLR2、3、4、5、7、8和9。
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●?NOD1/2 Ligand Screening
NOD1/2配體篩選服務利用HEK-Blue NOD cells。這些HEK-Blue NOD cells穩(wěn)定表達NF-κB誘導型SEAP報道基因和人或小鼠NOD1或NOD2基因?;衔锟稍谌撕?或小鼠NOD1和NOD2上測試。
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●?STING Ligand Screening
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●?RIG-I/MDA5 Ligand Screening
RIG-I/MDA-5配體篩選服務利用利用IRF途徑的HEK293細胞系和分泌型熒光素酶報告分析。它們過度表達人RIG-I或MDA-5基因,對5'ppp-dsRNA和轉染的poly(I:C)分別高度敏感?;衔锟梢栽谌薘IG-1和/或MDA-5上測試。
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●?Dectin-1 Ligand Screening
Dectin-1配體篩選服務利用HEK-Blue? Dectin-1 cells。這些細胞系表達不同的Dectin-1基因亞型。除了一個NF-κB誘導型SEAP報道基因外,它們還表達Dectin-1-NF-κB信號通路的基因?;衔锟稍谌薉ectin-1a、人Dectin-1b和/或小鼠Dectin-1a上測試。
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●?Mincle Ligand Screening
Mincle配體篩選服務利用HEK-Blue? hMincle cell line。該細胞共表達人單核巨噬細胞基因、單核巨噬細胞NF-κB信號通路基因和NF-κB誘導型SEAP報告基因。可以進行激動劑和拮抗劑試驗,盡管目前還沒有鑒定出對Mincle具有抑制活性的配體。
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服務優(yōu)勢:
→ 篩選服務速度快—篩選周轉時間僅3周
→?篩選服務靈活性高-可以根據(jù)客戶要求選擇和/或修改篩選參數(shù)。
→?篩選多種化合物成本更低
→?可靠性高—InvivoGen的篩選服務多年來一直被領先的生物技術和制藥公司以及學術機構所使用。
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TLR、NOD和RLR信號通路簡明示意圖
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InvivoGen開發(fā)了一系列功能性細胞分析來篩選激活或抑制模式識別受體(PRRs)的化合物,重點是TLRs、NOD1/2、RIG-I/MDA-5、C型凝集素和STING。這些敏感的分析采用了工程化的HEK293細胞,該細胞利用了經(jīng)典的報告系統(tǒng):一個NF-kB誘導型SEAP(分泌型胚胎堿性磷酸酶)和/或一個IRF(干擾素調節(jié)因子)誘導型sLUC(分泌型熒光素酶)??梢蕴峁?種服務選擇:
1. 復合物的初步檢測(第一階段):對一組模式識別受體進行單劑量測試。篩選是在單一濃度下進行的,通常是提供的原始化合物溶液的1:10稀釋度,或客戶指定的濃度。
2. 復合物不同劑量測試分析(第二階段):選取復合物樣本的三種不同濃度,通常為1:10、1:100、1:1000稀釋比例,來進行復合物激活模式識別受體的活性分析,可以根據(jù)客戶要求進行定制。
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