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【Mirus新品推薦】TransIT?-Lenti Transfection Reagent——重組慢病毒生產(chǎn)的理想選擇

2021-04-30
瀏覽次數(shù): 169

Mirus公司新推出轉(zhuǎn)染試劑TransIT?-Lenti Transfection Reagent,該產(chǎn)品適用于將載體轉(zhuǎn)染至貼壁的HEK 293T細(xì)胞中,可提高轉(zhuǎn)染效率,增加重組慢病毒產(chǎn)量。


產(chǎn)品特點(diǎn):

高性能——高達(dá)八倍的功能性滴度

操作簡(jiǎn)便——無(wú)需更換培養(yǎng)液基?

無(wú)動(dòng)物源性成分——安全可靠

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產(chǎn)品信息


TransIT?-Lenti Transfection Reagent

產(chǎn)品貨號(hào)

產(chǎn)品規(guī)格

供應(yīng)商

MIR 6603

1 × 0.3 ml

Mirusbio

MIR 6604

1 × 0.75 ml

Mirusbio

MIR 6600

1 × 1.5 ml

Mirusbio

MIR 6605

5 × 1.5 ml

Mirusbio

MIR 6606

10 × 1.5 ml

Mirusbio


相關(guān)產(chǎn)品推薦——TransduceIT? Transduction Reagent


TransduceIT? Transduction Reagent是一款陽(yáng)離子聚合物試劑,顯著提高靜止和分裂的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)基因表達(dá)。


產(chǎn)品信息


TransduceIT? Transduction Reagent

產(chǎn)品貨號(hào)

產(chǎn)品規(guī)格

供應(yīng)商

MIR 6620

1 ml

Mirusbio

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?【Mirus新品推薦】TransIT?-Lenti Transfection Reagent——重組慢病毒生產(chǎn)的理想選擇


1. TransIT-Lenti轉(zhuǎn)染試劑具有高功能性滴度.分別使用TransIT-Lenti (3:1, vol:wt), Lipofectamine? 2000 (3:1), Lipofectamine? 3000 (3:1:1), 25 kDa PEI (6:1), CaPO4 precipitation (4 μg pDNA/well)五種試劑將MISSION?載體(pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP?載體和慢病毒包裝試劑)轉(zhuǎn)染至貼壁293T/17細(xì)胞中。收集上清液,過濾(0.45 μm),用293T/17細(xì)胞滴定。慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)使用了TransduceIT?8 μg/ml),轉(zhuǎn)導(dǎo)72h后使用guava easyCyte? 5HT流式細(xì)胞儀檢測(cè)GFP表達(dá)情況。功能性滴度根據(jù)病毒的稀釋液與20% GFP陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行計(jì)算。

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2. 使用TransIT-Lenti實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染.?使用TransIT?-Lenti轉(zhuǎn)染試劑?(3:1, vol:wt)MISSION?載體(pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP?載體和慢病毒包裝試劑)轉(zhuǎn)染至貼壁293T/17細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染48h檢測(cè)GFP效率。圖片于轉(zhuǎn)染48h后拍自熒光顯微鏡。鏡下細(xì)胞變圓和細(xì)胞融合是由于假型化重組慢病毒VSV-G 蛋白的高表達(dá)。

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?【Mirus新品推薦】TransIT?-Lenti Transfection Reagent——重組慢病毒生產(chǎn)的理想選擇


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重組慢病毒顆粒和靶細(xì)胞感染概述


(1)?將包括編碼目的基因、水泡性口炎G蛋白(VSV-G)和必需的病毒蛋白(例如gagpolrev)的3-4種質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至生產(chǎn)細(xì)胞(例如293T)中。

(2)?病毒從生產(chǎn)細(xì)胞漿膜出芽的方式組裝及釋放到上清液中,并以VSV-G的囊膜蛋白包裹。將含有病毒的培養(yǎng)液用0.45微米的濾器進(jìn)行過濾以除去細(xì)胞。

(3)?重組病毒顆粒轉(zhuǎn)導(dǎo)靶細(xì)胞常用陽(yáng)離子聚合物來(lái)增加聚合和攝取。病毒進(jìn)入細(xì)胞后脫衣殼,將RNA基因組和病毒的酶暴露出來(lái)。病毒RNA被逆轉(zhuǎn)錄成DNA,然后整合到宿主基因組中。

(4)?轉(zhuǎn)錄和翻譯后由細(xì)胞產(chǎn)生目的基因所編碼的蛋白質(zhì)。

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