糖苷酶亦稱(chēng)糖苷水解酶(glycoside?hydrolase)。是用于各種糖苷或寡糖使糖苷鍵水解酶的總稱(chēng)。根據(jù)切割的糖的種類(lèi)可分為內(nèi)切糖苷酶（Endoglycosidase）和外切糖苷酶（Exoglycosidases）。內(nèi)切糖苷酶是催化水解寡糖及多糖的內(nèi)部糖苷鍵的酶，用于從糖蛋白上切割多糖的酶。其中內(nèi)切糖苷酶F和內(nèi)切糖苷酶H，可用于鑒別N-糖苷鏈的類(lèi)型。內(nèi)切糖苷酶F可斷裂糖蛋白的天冬酰胺和甘露聚糖的糖苷鍵，內(nèi)切糖苷酶H專(zhuān)一性水解兩個(gè)N-乙酰氨基葡糖之間的?β(1，4)糖苷鍵，其底物主要是高甘露糖型和雜合型糖鏈。
Prozyme提供了包括PNGaseF、Endo-H、Endo?F2、PNGaseA、O-Glycanase等的內(nèi)切糖苷酶。
肽N-?糖苷酶?F，即?PNGase?F，是一種酰氨酶，能夠在N-連糖蛋白的高甘露糖、雜合和復(fù)合寡糖部分最內(nèi)側(cè)的N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨殘基之間進(jìn)行切割。
糖苷內(nèi)切酶H（Endo?H）是從Streptomyces?plicatus中克隆，在大腸桿菌中表達(dá)得到的重組糖苷酶。Endo?H能夠?qū)?/span>N-糖蛋白中的高甘露糖和某些雜合型寡聚糖的殼二糖核心進(jìn)行切割，而不切割復(fù)雜多糖。酶切反應(yīng)切割寡糖二乙酰殼二糖核心的兩個(gè)N-乙?；咸前窔埢?，切割后保留天冬酰胺的一個(gè)N-乙酰葡糖胺殘基。該特性與PNGase?F（肽-N-糖苷酶?F）不同，它切割所有的天冬酰胺連接的寡糖。
重組內(nèi)切糖苷酶F2（Endo?F2）適于切除天然狀態(tài)下蛋白質(zhì)的N連接寡糖，特別是復(fù)雜型的寡糖，核心巖藻糖對(duì)酶切效果影響不大。Endo?F2酶切位點(diǎn)位于無(wú)糖核心的兩個(gè)N乙酰氨基葡萄糖間的糖苷鍵，酶切后，釋放出截短的游離寡糖，蛋白質(zhì)天冬酰胺殘基上仍保留一個(gè)N乙酰氨基葡萄糖。某些寡糖鏈，由于其所處位置受蛋白空間結(jié)構(gòu)的影響，使用經(jīng)典的PNGaseF無(wú)法在天然狀態(tài)下將寡糖切除，須將蛋白進(jìn)行變性處理。Endo?F2與PNGaseF相比，對(duì)蛋白的空間結(jié)構(gòu)的影響不敏感，因此更適合酶切天然狀態(tài)下蛋白質(zhì)的N連接寡糖。
Prozyme提供的內(nèi)切糖苷酶列表：
產(chǎn)品類(lèi)型 | ? 產(chǎn)品名稱(chēng) | ? 產(chǎn)品編號(hào) | ? 規(guī)格 |
PNGaseF ? | ? N-Glycanase? | ? GKE-5006A | ? 1?ea?(100mU※?in?40?μl) |
? N-Glycanase? | ? GKE-5006B | ? 1?ea?(200mU?in?80?μl) |
? N-Glycanase? | ? GKE-5006D | ? 1?ea?(1U?in?400μl) |
? N-Glycanase?-Ultra | ? GKE-5020B | ??1?ea?(400mU?in?40μl) |
? N-Glycanase?-Ultra | ? GKE-5020D | ? 1?ea?(1U?in?100μl) |
? Glyko??N-Glycanase-PLUS | ? GKE-5010B | ??1?ea?(400mU?in?40μl) |
?Glyko??N-Glycanase-PLUS | ? GKE-5010D | ? 1?ea?(1U?in?100μl) |
? Glyko??PNGase?F?(Chryseobacterium ? [Flavobacterium]?meningosepticum) | ? GKE-5003 | ? 1?ea?(100?mU?(50?μl)) |
Endo-H | ? Glyko??Endoglycosidase?H?(recombinant?gene? from?Streptomyces?plicatus,?expressed?in?E.?coli) | ? GKE-5002 | ? 1?ea?(30?mU?(200?μl)) |
Endo?F2 | ? Glyko??Endo?F2?(recomb?Chryseobacterium? ? [Flavobacterium]?meningosepticum?expressed? ? in?E.?coli) | ??GKE-5008 | ? 1?ea?(6?mU?(60?μl)) |
PNGaseA | ? Glyko??PNGase?A?(almond) | ? GKE-5011A | ? 1?ea?(2mU) |
? Glyko??PNGase?A?(almond) | ? GKE-5011B | ? 1?ea?(10mU) |
?O-Glycanase | ? Glyko??O-Glycanase?(recombinant?gene?from? ?Streptococcus?pneumoniae,?expressed?in?E.coli) | ? GK80090 | ??1?ea?(50?mU?(40?μl)) |
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