治療性蛋白質(zhì)的糖基化譜對其藥理學性質(zhì)發(fā)揮著重要作用,會影響免疫原性、藥代動力學和藥效學。然而,由于目前的手動樣品前處理方法復雜、持續(xù)多日,只能對開發(fā)流程中代表關鍵決策點的樣品進行分析。為了滿足針對生物仿制藥和新型生物藥物開發(fā)日益嚴格的法規(guī)要求,提供更高的數(shù)據(jù)質(zhì)量和分析通量速度,ProZyme 推出GlykoPrep? 樣品快速制備平臺, GlykoPrep-plus先進化學試劑能夠?qū)崿F(xiàn)快速的N-糖鏈消化、標記和凈化,為您提供穩(wěn)定和可重現(xiàn)的定量結果。
該平臺主要以AssayMAP?小柱(見右圖)為基礎,該小柱包含5μl的填充床,可填充粒徑在20到100μm之間的幾乎所有聚合物、硅膠和凝膠型樹脂。樣品杯最大樣品承載體積為200μl。 | ? |
?AssayMAP?小柱可放置在特殊的模塊支架上,結合相關的接收板和收集板(96孔式),完成樣品的制備收集。實驗時,樣品、緩沖液及其它試劑加入到樣品杯中,通過微孔板離心機的低速離心處理,溶液流經(jīng)樹脂填充床。兩塊板同時使用,可最多制備192個樣品。 | ???? ??? |
平臺特點:
● 從純化到聚糖釋放,完成整個樣本制備流程just 3h, not 3-4 days ● 非選擇性,定量釋放及回收完整的N-聚糖 ● 選擇靈活,可實現(xiàn)高通量(處理1-192個樣本) ● 室溫標記,無唾液酸損失,標記效率>80% ● 與多種自動化平臺的微孔板液體處理系統(tǒng)兼容??????????????????????????????????????????? | ??? ? |
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?高 效
圖示:采用快速糖樣本制備平臺制備的N-糖鏈糖類,可標記高達25?μg的糖蛋白(N-糖鏈糖類含量高)。對于N-糖鏈寡糖含量低的樣本(如IgG,<0.1μg)亦能精確標記(圖中未顯示)。
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?重復性佳
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圖示:某一IgG樣本用該平臺重復檢測96次的結果。結果顯示該平臺制備樣本時具有很好的重復性,CV<4%,版圖顯示無位置偏差。
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平臺組成:
◆ GlykoPrep? Digestion Module ◆?GlykoPrep? Labeling Module ◆?GlykoPrep? Cleanup Module ? ? ? ? ? ? ? ? | ?? ?應用 | ?檢測方法 | ● 細胞培養(yǎng)優(yōu)化 ●?菌株篩選 ●?產(chǎn)品表征 ●?質(zhì)量源于設計中的工藝過程分析 ●?質(zhì)量控制 | ●?HPLC ●?LC/MS ●?CE ●?MS ●?HPAEC-PAD | |
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?樣本類型 | ?自動化選擇 | ●?單克隆抗體 ●?Fc融合蛋白 ●?其他重組糖蛋白 | ●?手動處理 ●?液體處理系統(tǒng),實現(xiàn)半自動化 ●?全自動化 | |
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儀器需求:
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| 1.??Eppendorf??5804離心機? 2.?Eppendorf?A-2-DWP(5804/10)?轉(zhuǎn)子(高度≥44mm)? 3.?GS150?AssayMAP?干式加熱器及Blocks 4.?Thermo?SPD2010?SpeedVac?離心式真空濃縮儀(可選)?
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耗材需求:
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產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品描述 |
AM200 | AssayMAP???Starter?Labware?Kit |
組分: WS0264?Rack?(pk?of?2) WS0265?Receiver?Plate?(pk?of?2) WS0266?Lid?(pk?of?2)WS0267?Purification?Collection?Plate?(pk?of?2) WS0268?Waste?Plate?(pk?of?2) WS0269?Cleanup?Collection?Plate?(pk?of?2)1?ea? Gilson?D-200?Pipet?Tips?(1?ea) Gilson?15%?coupon |
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實驗原理圖:?
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實驗流程示意圖:?
? ?*?圖:GlykoPrep??Rapid?N-Glycan?Preparation?with?InstantAB?實驗流程
產(chǎn)品類型 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 |
Kit | GlykoPrep??Rapid?N-Glycan?Preparation?with?2-AB | GP96NG-AB | 1?kit |
GlykoPrep???Rapid?N-Glycan?Preparation?with?InstantAA?? | GP96NG-LA | 1?kit |
GlykoPrep??Rapid?N-Glycan?Preparation?with?InstantAB? | GP96NG-LB | 1?kit |
GlykoPrep???Rapid?N-Glycan?Preparation | GP96NG-LF | 1?kit |
GlykoPrep??Rapid?N-Glycan?Preparation?with?2-AB?(24-ct) | GP24NG-AB | 1?kit |
GlykoPrep??Rapid?N-Glycan?Preparation?with?InstantAA??(24-ct) | GP24NG-LA | 1?kit |
GlykoPrep??Rapid?N-Glycan?Preparation?with?InstantAB? | GP24NG-LB | 1?kit |
GlykoPrep??Rapid?N-Glycan?Preparation?(24-ct) | GP24NG-LF | 1?kit |
Individual?Modules | GlykoPrep??Digestion?Module | GS96-RX | 1?ea |
GlykoPrep??Rapid-Reductive-Amination??2-AB?Labeling?Module | GS96-AB | 1?ea |
GlykoPrep??InstantAA??Labeling?Module* | GS96-LA | 1?ea |
GlykoPrep??InstantAB??Labeling?Module* | GS96-LB | 1?ea |
GlykoPrep??Cleanup?Module | GS96-CU | 1?ea |
Protein?A?Cartridges | P50030_KIT | 1?ea |
GlykoPrep??Rapid-Reductive-Amination??2-AB?Labeling?Module?(24-ct) | GS24-AB | 1?ea |
GlykoPrep&trade?Digestion?Module?(24-ct) | GS24-RX | 1?ea |
GlykoPrep??InstantAA??Labeling?Module?(24-ct)* | GS24-LA | 1?ea |
GlykoPrep??InstantAB??Labeling?Module?(24-ct)* | GS24-LB | 1?ea |
GlykoPrep??Cleanup?Module?(24-ct) | GS24-CU | 1?ea |
Protein?A?Cartridges?(24-ct) | P50038 | 1?ea |
Toolkit&?Equipment | Gilson??Single?Channel?Diagnostic?(SD)?TOOLKIT?N-Glycan | 54030001 | 1?kit |
Gilson??Multichannel?Diagnostic?(MD)?TOOLKIT?N-Glycan | 54030002 | 1?kit |
Starter?Labware?Kit | AM200 | 1?ea |
Receiver?Plate?Bulk?Pack?(formerly?P50019) | G5524-60041 | 1?pack |
Cartridge?Rack?Bulk?Pack?(formerly?P50036) | G5524-60042 | 1?pack |
Rack?Lid?Bulk?Pack?(formerly?P50037) | G5527-60043 | 1?pack |
Heater?&?Incubation?Blocks | GS150 | 1?ea |
Heater | WS0271 | 1?ea |
Incubation?Block | WS0272 | 1?ea |
Microplate?Centrifuge | Y-CENTRIFUGE | 1?ea |
Deep?Plate?Rotor | Y-ROTOR | 1?ea |
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*必須與GlykoPrep??Digestion?Module同時使用,才可發(fā)揮最佳的快速制備效果。