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StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

2022-11-18
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星光染料是一種獨特的熒光納米粒子,將它與 Bio-Rad 高度驗證的抗體結合,專為流式細胞術開發(fā),為您提供卓越染色效果。星光染料使稀有群體和低密度抗原易于分辨,同時保持適用于任何多色實驗的靈活性。

本篇將幫助你了解高亮星光染料如何助力流式細胞術實驗。


優(yōu)勢:

不僅,且發(fā)射波譜

,無需特殊染色溶液

穩(wěn),批間重現(xiàn)性好

,溶液兼容性好

,與所有儀器和抗體可共用


第一批上市染料

StarBright Blue

StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

StarBright Violet

StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

明亮,溢漏減少

星光染料具有優(yōu)化的激發(fā)和發(fā)射特性,并具有優(yōu)越的亮度。它可以更好地分辨特定細胞群,包括稀有和低密度抗原,同時最大限度地減少熒光溢漏,更大程度地避免染料在多色方案中擴散現(xiàn)象。用星光染料,你可以輕松地建立更大的實驗方案。

StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

圖1. 和同類染料相比,星光染料改進了亮度和熒光溢漏。A, 和其它兩個染料相比,SBB700(粉紅色)在640nm只是非常有限的被激發(fā)。B, 人外周血在含1%BSA的PBS溶液中用CD4 AMO (Cat.#MCA1267AMO)、CD4 Brilliant Violet 510和CD4 StarBright Violet 515(#MCA1267SBV515)分別染色,所有數(shù)據(jù)在ZE5流式細胞分析儀上采集。直方圖顯示了這些抗體的亮度,圖片右側顯示了這三種染料的染色指數(shù)。


很容易融入到你現(xiàn)有的實驗

它們與大多數(shù)染色方案兼容,幾乎可以在任何緩沖液中工作,包括商用聚合物染色緩沖液,它們的性能不會有損失(圖 2)。它們可以與其他星光染料、有機熒光染料、基于蛋白質的熒光染料和其他聚合物染料結合,而不需要特殊染色方案(圖 2C),使您可以輕松構建更大的多色實驗方案。

StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案
StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

圖2. 緩沖溶液的兼容性。人外周血分別在含有BSA、EDTA和NaN3的緩沖液中,A, 用CD4 Pacific Blue和CD4 SBV440染色,B, 用CD4 BV510和CD4 SBV515染色,星光染料的性能均沒有下降。C, 人外周血在含1%BSA的PBS溶液中用CD3 A488 (#MCA463A488), CD19 SBB700 (#MCA1940SBB700), CD4 SBV515 (#MCA1267SBV515), CD8 SBV440 (#MCA1226SBV440), CD127 A647 (#HCA145A647), and CD25 PE (#MCA2127PE)染色,所有數(shù)據(jù)在ZE5流式細胞分析儀上采集。與其他基于聚合物的染料不同,組合多種星光染料不需要特殊的染色緩沖液。


與所有流式細胞儀兼容

StarBright 染料在 ZE5 流式細胞分析儀上開發(fā)出來,可以用于任何帶有合適激光器和濾光片的流式細胞儀,包括流式細胞分選儀。此外,它們也已經被用在光譜流式細胞儀上。

StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

圖 3. 儀器兼容性。人外周血在含 1%BSA 的 PBS 中,用 CD8 SBV610(#MCA1226SBV610)、CD4 SBV515(#MCA1267SBV515)、CD127 A647(#HCA145A647)和 CD25 SBV440(#MCA2127SBV440)4℃染色 30 分鐘。使用 A, 常規(guī)流式細胞儀和 B, 光譜流式細胞儀獲得了

類似的 Treg( CD4+、CD25+、CD127lo)結果。C, 光譜流式上,人外周血用 CD4BV605 和 CD8SBV610(MCA1226SBV610)染色,易于識別。


批間重現(xiàn)性好

與某些聚合物和其他染料不同,星光染料可以具有很高的批間重現(xiàn)性(圖 4),穩(wěn)定,耐光漂白,不會隨著時間的推移而損失性能。它們還表現(xiàn)出較少的交叉激光激發(fā),不會像串聯(lián)染料一樣只受主體染料激發(fā)。此外,它們可以固定在多聚甲醛中,熒光幾乎沒有下降。


表1.批間重現(xiàn)性

批次染色指數(shù)靶細胞群
SBV515-1

213.5

210.0

203.4

72.9%

70.7%

70.7%

SBV515-2

253.2

245.1

258.5

72.8%

72.7%

72.1%

SBV515-3

222.4

204.8

193.6

71.9%

70.5%

69.8%

平均值222.771.6%
偏差23.710.01
StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

圖4. 星光染料的批間重現(xiàn)性。用三批CD4?

SBV515(MCA1267SBV515)對人外周血進行

染色,以評估染色指數(shù)的差異和各批CD4陽性

率。表中所示的重疊(實線)、實際染色指數(shù)

和陽性百分比數(shù)據(jù)的變化都是最小。


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