細(xì)胞周期檢測五個小知識點(diǎn)匯總整理：

1、流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期的原理

在細(xì)胞周期的不同時期，DNA含量存在差異，用DNA染料進(jìn)行染色（如應(yīng)用最廣泛的染料PI），DNA含量多，熒光強(qiáng)度高，DNA含量少，熒光強(qiáng)度低，因此可以根據(jù)DNA熒光強(qiáng)度的變化，來判斷細(xì)胞處于哪個時期。

2、利用PI分析細(xì)胞周期，需要加入RNase消除RNA的影響

PI是通過插入雙螺旋結(jié)構(gòu)中疊加在一起的堿基對核酸進(jìn)行染色的，并且它可以插入所有DNA和RNA的雙鏈區(qū)，PI不是DNA特異性的，所以需要加入RNase消除RNA的影響。

3、細(xì)胞周期檢測時，一定不要洗滌

不同于蛋白染料和細(xì)胞之間的牢固結(jié)合，DNA與染料的結(jié)合是一種結(jié)合態(tài)和游離態(tài)之間松散的平衡，不是很牢固，所以洗滌步驟會造成染料丟失，降低核酸的特異性熒光，造成測量值變小，因此，DNA染色時一定不要洗滌。

4、 固定細(xì)胞和活細(xì)胞的細(xì)胞周期檢測

PI、7-AAD、TOTO-3和YOYO-1等染料不能透過完整的細(xì)胞膜，在染色時，一般需要用70%乙醇固定、通透細(xì)胞膜，從而使這些染料進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)與DNA結(jié)合，所以市面上很多的細(xì)胞周期檢測試劑盒都是需要固定細(xì)胞的；如果想要檢測活細(xì)胞樣本，可以咨詢我們在線客服人員。

5、其他應(yīng)該注意的問題

? 儀器：定期清洗噴嘴，激光預(yù)熱時間充分，低流速進(jìn)樣等。

? 樣本：消化要充分，但不能過度，保證細(xì)胞不粘連、不破裂，染色要充分等。

如需了解相關(guān)的檢測細(xì)胞周期的產(chǎn)品，請聯(lián)系欣博盛在線客服

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