ELISA(酶聯(lián)免疫吸附劑測定)是一種快速、靈敏、準(zhǔn)確可靠的一種定量分析方法,樣本的處理對于ELISA實驗的成功有著舉足輕重的作用。 利用ELISA進(jìn)行檢測的樣本類型包括常見的血液(血清、血漿),組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清以及不常見的皮膚組織、尿液、糞便、肺泡灌洗液、唾液、腦脊液、胸腹水、前列腺液、精液、陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、處理方法和保存都會影響到ELISA實驗的結(jié)果。
下面小欣就整理了ELISA不常見痰液樣本的處理方法,希望對您有所幫助。如果您需要選購相關(guān)的ELISA試劑盒,也可以聯(lián)系我們欣博盛生物。
1)選擇痰液中較為粘稠部分稱重, 加兩倍于痰量的 0.1% DTT(二硫蘇糖醇)。DTT 的主要作用是溶解粘液,用吸管反復(fù)吹打,漩渦器振蕩 15s,37 度恒溫水浴振蕩 5 分鐘;
2)加入兩倍于痰量的 PBS 緩沖液繼續(xù)振蕩 15-20 分鐘,150 目的金屬絲網(wǎng)過濾,1500 rpm 離心 10 分鐘吸取上清液檢測。
處理樣本的過程就是收集目標(biāo)蛋白的過程,由于蛋白容易變性,降解,故該過程應(yīng)盡量溫和。樣本處理之后的儲存也非常重要,尤其注意不要反復(fù)凍融,樣本處理之后可分裝密封保存,4 度保存應(yīng)小于 1 周,-20 度不應(yīng)超過 1 個月,-80 度不應(yīng)超過 2 個月。在標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫,不應(yīng)加熱使之融解。樣本的處理是實驗成功的第一步, 以上就是關(guān)于ELISA特殊樣本痰液樣本處理方法的簡述,供研究者參考。
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