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Bioxcell抗體常見問題

2021-06-08
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● Bioxcell抗體如何儲存?

請將抗體置于4℃避光儲存。即使分裝后,也不推薦將抗體冷凍儲存,因?yàn)閮鋈谘h(huán)會導(dǎo)致抗體活性降低。一般來說,蛋白在高濃度條件下儲存不易降解,因此應(yīng)避免將抗體稀釋至工作濃度后在4℃條件下儲存超過一天,即應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。按要求儲存且保證抗體無菌,抗體活性可保持長達(dá)一年甚至更長時(shí)間。


●?收到產(chǎn)品后應(yīng)如何處理?

收到抗體后,在分裝儲存及使用時(shí)需在生物安全柜中進(jìn)行,并使用無菌槍頭、離心管、注射器和緩沖液等,降低污染率。另外,使用前抗體要處于低溫狀態(tài)。


●?Bioxcell產(chǎn)品的保質(zhì)期是多久?

如果按說明書要求儲存產(chǎn)品,BioXCell的產(chǎn)品自收到之日起一年內(nèi)保持穩(wěn)定。


●?Bioxcell抗體以何種形式提供?

Bioxcell抗體均以無菌PBS緩沖液的形式提供。該溶液中不含穩(wěn)定劑、防腐劑、載體蛋白、甘油或任何其他添加劑。PBS緩沖液由Na2HPO4、NaH2PO4和NaCl組成,每個(gè)成分的具體摩爾濃度由抗體pI值決定,即抗體的pI值決定了PBS緩沖液的pH值。如有特殊要求,Bioxcell可以在其他緩沖液中提供抗體,但不能提供凍干粉末抗體。


●?Bioxcell抗體的濃度是多少?

Bioxcell不同批次抗體的濃度不同,但一般來說是在4到10mg/mL之間。包裝的離心管上會標(biāo)記抗體的具體濃度。如果需要在訂購之前知道產(chǎn)品的確切濃度,請聯(lián)系欣博盛生物。


●?Bioxcell抗體的氨基酸或DNA序列是什么?

Bioxcell抗體是使用雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的,所以抗體的氨基酸或DNA序列是未知的。


●?Bioxcell抗體的抗原表位是什么?

BioXcell不提供抗原表位信息,請客戶自行參考文獻(xiàn)。


●?應(yīng)如何稀釋抗體至工作濃度?

建議使用官網(wǎng)推薦的InVivoPure稀釋緩沖液稀釋Bioxcell抗體。在沒有InVivoPure稀釋緩沖液的情況下,可以使用與抗體PBS緩沖液pH相同或相近的的無菌PBS,以避免蛋白聚集。稀釋時(shí),建議使用預(yù)冷緩沖液,并在生物安全柜中操作,使用無菌槍頭、試管、注射器和緩沖液來保持抗體的無菌性。應(yīng)避免將抗體稀釋至工作濃度后在4℃條件下儲存超過一天。


●?Bioxcell抗體是否適用于體內(nèi)注射實(shí)驗(yàn)?

Bioxcell產(chǎn)品均適用于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究,它們以PBS的形式提供,不含疊氮化物等防腐劑或BSA等蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑,內(nèi)毒素水平< 2EU/mg(InVivoMab),符合大多數(shù)體內(nèi)研究的條件。為了滿足更嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)要求,Bioxcell還可提供更低內(nèi)毒素水平的抗體<1EU/mg(InVivoPlus)。注:有些產(chǎn)品廠家未經(jīng)過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,具體請參考產(chǎn)品的Reported Applications。


●?Bioxcell抗體在體內(nèi)的半衰期是多久?

廠家沒有抗體在體內(nèi)的半衰期數(shù)據(jù)。因?yàn)榭贵w的半衰期是高度可變的,并且受到物種、同型、抗原分布、抗原濃度和許多其他因素的影響。建議閱讀感興趣抗體已發(fā)表的相關(guān)文獻(xiàn),參考與您實(shí)驗(yàn)條件及設(shè)計(jì)相近的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),預(yù)估抗體的半衰期。


●?實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)多久注射一次?每次注射多少抗體?

實(shí)驗(yàn)中很多細(xì)節(jié)都會影響抗體的最佳使用量及注射頻率,例如小鼠品系、疾病模型、實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間、目標(biāo)組織、抗原濃度等等。因此,客戶最好通過閱讀相關(guān)的參考文獻(xiàn)確定最佳使用劑量及注射頻率的范圍,在此基礎(chǔ)上進(jìn)行優(yōu)化。建議客戶在正式實(shí)驗(yàn)之前,先做一個(gè)小規(guī)模的預(yù)實(shí)驗(yàn),以摸索最適的實(shí)驗(yàn)條件。注:Bioxcell官網(wǎng)每個(gè)產(chǎn)品介紹頁下面都會有最新的參考文獻(xiàn)供客戶參考。


●?Bioxcell InVivoMab和InVivoPlus兩種級別的抗體有什么區(qū)別?

InvovoPlus級別的產(chǎn)品內(nèi)毒素含量更低,經(jīng)過多種實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,更適合用于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究,具體區(qū)別請見下表:


InVivoMabInVivoPlus
純度>95%>95%
蛋白完整性√(verified via SDS-PAGE)√(verified via SDS-PAGE)
內(nèi)毒素濃度<2 EU/mg<1 EU/mg
不含疊氮化物和載體蛋白
是否適用于體內(nèi)研究
是否提供大包裝
是否經(jīng)WB、FCELISA驗(yàn)證
驗(yàn)證蛋白聚集≤5%
是否經(jīng)過鼠科病原體檢測
產(chǎn)品貨號BE-開頭BP-開頭


●?抗體收到后有漂浮物、絮狀沉淀或聚集物是否正常?應(yīng)如何處理?

溫度變化、凍融、運(yùn)輸過程中的震動或長期貯藏等環(huán)境條件可能會導(dǎo)致蛋白質(zhì)聚集,這些聚集物可能會沉淀在離心管的底部,或漂浮溶液中,因此收到抗體后有少量的絮狀物屬于正常現(xiàn)象??稍谑覝叵峦ㄟ^輕微的震動、過濾或離心去除。


●?沒注意說明書上的儲存要求,將抗體置于室溫儲存了一段時(shí)間,或者抗體過了一年的有效期,是否還可以繼續(xù)使用?

一般來說,室溫下放置幾個(gè)小時(shí)不會影響抗體的活性,但是放置幾天或者更長時(shí)間則有可能會導(dǎo)致蛋白降解,影響抗體活性。但抗體是否可繼續(xù)用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),需進(jìn)行相關(guān)的活性測試。為確認(rèn)抗體是否降解,最簡單的方法是取大約10ug的抗體進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)。在非還原條件下,如果在抗體分子量位置只有一條條帶,則表明抗體未降解,如果蛋白質(zhì)未通過凝膠遷移,或者有許多其他的條帶,則表明抗體已降解。但這個(gè)測試只是驗(yàn)證抗體是否降解,不能確認(rèn)抗體功能是否正常。確認(rèn)抗體在體內(nèi)是否起作用的唯一方法是進(jìn)行小規(guī)模的體內(nèi)測試,以驗(yàn)證抗體功能的完整性。




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