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抗體挑選的四個原則

2023-06-06
瀏覽次數(shù): 96

1.要測誰?

確認(rèn)目標(biāo)蛋白特性

抗體挑選的四個原則


2.誰去測?

抗體種類

a.單克?。簩R恍愿?,靈敏度較多克隆低

b.多克?。红`敏度高,批次差異較大

c.重組抗體:批次差異小


抗體驗證

抗體挑選的四個原則


3.被誰測?

一抗二抗配對

a.兔配兔,鼠配鼠,一抗二抗想配不出錯

b.做免疫組化如一抗宿主種屬和樣本種屬來源相同時,需要注意樣本內(nèi)源性IgG是否與二抗結(jié)合產(chǎn)生假陽性


呈色方式

a.HRP,AP呈色

b.熒光(多染時抗體種屬或亞型不相同,使用的熒光波長不相近)


二抗專一性

a.使用交叉預(yù)吸附型二抗提高抗體專一性


4.在哪測?

做什么應(yīng)用,用什么抗體

a.環(huán)境不同,依應(yīng)用挑抗體

抗體挑選的四個原則

b.做IP實驗時,挑選EasyBlot二抗,去除重輕鏈干擾

抗體挑選的四個原則



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